高效微流电动液相色谱系统测定(S)- 萘普生印迹单体的手性识别能力

2020-04-24 16:24:19, UNIMICRO 上海通微分析技术有限公司



背景介绍



许多生物分子有具有特异性识别某种类型分子的基本特性。开发一种生产具有可识别特性的材料是非常重要的。分子印迹技术是一种简单、有效的制备聚合物基体的方法,其模板材料的选择性分子识别技术得到了人们的认可。分子印迹聚合物(MIPs)相对于生物分子的优点是成本低,并且具有良好的物理和化学稳定性。通过固相萃取、配体结合测定、传感器和色谱法可测定MIPs的识别特性。

从色谱的角度,主要通过高效液相色谱(HPLC)和毛细管电色谱(CEC)来观察MIPs的识别特性。CEC综合了毛细管电泳(CE)分离效率高的优点,以及HPLC可提供多种保留机制和选择性的特点。CEC的MIP单体模式导致化学品的消耗最小,尤其是印迹分子。此外,与基于HPLC的MIP相比,基于CEC的MIP单体更容易实现大规模生产。因此,基于CEC的MIP单体是研究MIPs识别特性的一个很有前途的工具。然而,选择性识别不仅取决于MIP单体,还取决于识别环境。一旦选择和制备了单体,调控其他参数以获得最佳的识别选择性更为重要。萘普生是一种2-芳基丙酸非甾体类抗炎药物,(S)-萘普生的生物活性是(R)-萘普生的28倍。近年来,制备了(S)-萘普生MIPs,并用高效液相色谱法对其手性识别能力进行了评价,但手性识别能力不高,峰展宽和尾缩现象明显。因此,我们通过CEC评价了由原位聚合法制备的(S)-萘普生单体分子印迹聚合物的印迹选择性。系统的研究了影响印迹选择性的因素,包括施加电压、柱温、表面活性剂、改性剂等。在优化的条件下,提高了识别能力,在一定程度上克服了峰展宽和峰尾效应。

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测试条件

仪器:TriSep ®-3000高效微流电动液相色谱系统


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测试结果

图1不同电压下萘普生在(S)-萘普生印迹单体上的手性识别

注:A  5 kV;B 10 kV;C 15 kV;D 20 kV;E 25 kV



图2不同温度下萘普生在(S)-萘普生印迹单体上的手性识别

注:A 15℃;B 25℃;C 35℃;D 45℃;E 55℃



图3不同表面活性剂下萘普生在(S)-萘普生印迹单体上的手性识别

注:A无表面活性剂;B CTAB(1mM);C SDS(3mM);

D 吐温20(40mM)


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结论

采用TriSep ®-3000高效微流电动液相色谱系统,系统的研究了施加电压、柱温、表面活性剂、改性剂等对印迹选择性的影响。实验结果表明,良好的手性识别不仅依赖于MIP单体,还依赖于CEC检测参数,柱温为25-35℃、三种不同表面活性剂的加入均可提高(S)-萘普生MIP单体在CEC模式下的选择识别性。手性拆分与识别机理的研究正在进行中。


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