2020-02-17 23:18:09, 飞飞 赛默飞色谱与质谱分析
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柴瑞平 刘国强 彭倩
近日,世界卫生组织已正式宣布将新型冠状病毒所致的疾病命名为“COVID-19”……如何采取有效措施抑制病情从轻症转向危重症是目前诊疗中的重中之重,除了现有抗病毒手段,中医经验方在减轻发热咳嗽症状、控制病情进展及调整免疫失衡方法具有独特优势,中西医结合治疗的临床表现令人瞩目。(来源:中国新闻网)
减轻发热症状
1
减轻咳嗽症状
2
国家卫生健康委员会发文《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(第五版)》提出本病属于中医“疫病”范畴,各地可根据病情、当地气候特点以及病人体质等情况辨证论治。各地中医药管理机构积极发挥中医药的优势参与战“疫”,均取得不俗的成绩。
赛默飞可以提供完整的中药分析解决方案,涵盖了从药用植物天然产物分析到中药临床组学分析等应用领域,力争保证中药质量,阐明作用机理,为中医药临床价值贡献自己的一份力量。
黄芩
1
黄芩,苦寒清泄,善清热燥湿、泻火解毒,是本次战“疫”的关键药味之一,频频出现中医处方中,如金花清感颗粒、防风通圣丸、清肺排毒汤、蓝芩口服液等。从黄芩配方颗粒特征图谱,可以大致看出其关键的药效物质包含:
1
特征图谱分析
峰2(S):黄芩苷;峰5:汉黄芩苷;峰6:黄芩素;峰7:汉黄芩素
图1.黄芩供试品特征色谱图
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2
含量测定分析
图2.黄芩供试品色谱图
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图3.黄芩苷对照品色谱图
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3
重复性考察
图4.黄芩供试品重复性考察色谱图
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样品中黄芩苷6针重复性考察中保留时间RSD为0.13%,峰面积RSD为0.52%,符合方法学要求。
葛根
2
葛根,素有解肌退热,升阳止泻的功效,是本次临床抗“疫”中葛根汤的君药,作为透表散邪第一方,切合中医对新冠肺炎早期干预的基本原则。从葛根配方颗粒特征图谱,可以大致看出其关键的药效物质包含:
峰3(S):葛根素;峰8:黄豆苷元
图5.葛根供试品色谱图
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附子黄芪配伍分析
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附子黄芪配伍分析:黄芪补气升阳,固表止汗,利水消肿;附子回阳救逆,温肾助阳,祛寒止痛。现代药理研究表明,附子与黄芪配伍使用,LD50值显著增大,表明黄芪对附子有显著的解毒作用。
本实验利用Q Exactive高分辨质谱对附子单煎组、黄芪单煎组、附子黄芪合煎组、附子黄芪混合的化学成分进行系统分析,以期为黄芪对附子的解毒机理提供物质基础。
图6. 赛默飞基于液相色谱及质谱联用技术的配方颗粒成分分析解决方案(点击查看大图)
由下图7中可知:正负离子数据中,QC样品(选择QF合煎组)聚合度非常好,证明整个样品采集过程中,仪器状态很稳定;四组样品间在PCA上的相对位置一致,分列不同象限中,差异较大;单煎混合组和合煎组之间聚集在两个区域,表示样本间有一定差异。
图 7. 多维统计分析_PCA 得分图
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图 8. 附子黄芪合煎组在正负离子模式下的总离子流图
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利用Compound Discoverer软件,结合标准中药数据库及公开数据库模式对样品中的化合物进行鉴定,共鉴定179种可能的成分,主要为氨基酸、生物碱、黄芪皂苷、黄酮类。按照p≤0.05, FC ≥2为标准选择差异性代谢物,附子黄芪合煎组中可见乌头碱、新乌头碱等双酯型乌头碱含量降低。文献报道,双酯型乌头碱是附子中主要毒性成分,表明合煎组的减毒机制。
黄精
4
黄精炮制分析:传统医学认为黄精性平、味甘, 入脾、肾、肺经, 具有补肾益精、滋阴润燥等功效。生黄精具有麻味, 生品服用时, 口舌麻木, 刺激咽喉。经过炮制后, 消除其刺激性及副作用, 糖性变浓裂, 口感好, 利于服用。
本实验利用Q Exactive Focus分析炮制对黄精化学成分产生的影响,为今后阐明黄精炮制作用机制及临床应用奠定基础
图9. 样品在正负离子模式下的总离子流图
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如图10所示,黄精经过炮制后可见明显的成分差异。通过火山图分析差异性成分可知黄精炮制后正离子模式下可见385个化合物含量显著降低,326个化合物显著增加;负离子模式下可见287个化合物含量显著降低,231个化合物显著增加。
图10. 正负离子模式下的火山图
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结合Compound Discoverer软件和中药数据库,通过二级数据库自动匹配的功能,从黄精与酒黄精中共鉴定出104种可能的化学成分,主要为氨基酸类、生物碱类、有机酸类成分。此外还鉴定出87个可能性的皂苷类成分。
黄精炮制后5-羟甲基糠醛的含量显著增加,氨基酸及生物碱类成分显著降低。皂苷类成分发生降解,生成次级苷和苷元。此现象可为黄精炮制的药理和毒理研究提供了一定的物质理论基础。
“柱”力战“疫”,完整色谱耗材方法包不容错过。中药成分复杂,选择合适的色谱柱不仅可以得到完美的分离效果,还能加速中药质控研究,满足抗“疫”时期生产质控所需的效率和速度。稳定、快速、准确、高效,赛默飞色谱耗材方法包凭实力助力新冠治疗。
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小结:赛默飞色谱与质谱结合耗材方法包,完全可以满足药用植物、中药材、饮片、配方颗粒、中成药特征图谱、含量测定及作用机理研究的实验需要,广泛用于质量检测一线,为药品有效性保驾护航。
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