课堂 | 科技改变实验，感受 THUNDER 之美！（中篇）

宽场显微镜（对，就是平时常用的正或倒置荧光显微镜）成像简单、快速、景深大，是生命科学研究中广泛使用的工具。但其弊端也显而易见：被观察的样品有限，厚组织观察时犹如高度近视，细节若影若现，图像后期分析困难且不准确，如常见的细胞计数、荧光强度定量和组间对比、结构判断等。

为了获得清晰的结构信息和准确的分析结果，除了耗时耗力的后期图像处理外，我们只能选择其他方法，例如共聚焦显微镜，但这常常以牺牲成像速度、样品厚度为前提，也不能满足当前活细胞、长时间、厚样品和 3D 结构研究热点的要求。

THUNDER Imager 高速、高分辨率宽场显微镜应运而生，特别适合当下长时间活细胞、肿瘤球/体外类器官等研究中的样品越来越大、越来越厚的研究趋势，图像采集的同时去除样品非焦平面的杂散光信号、还原生命结构的清晰之美！

从细胞、组织到模式生物，针对不同研究对象，THUNDER Imager 家族都有与之匹配的型号，以满足各种实验的需求。

作为一个曾经的科研小能手，小编深知，结果和数据是科学研究的最终信仰，千言万语不如一张高质量的结果图片。

所以，今天，小编带大家去领略全球科学家使用 THUNDER Imager 3D Cell Culture 和 3D Live Cell 获得的全新大片！

▲ 图 1.小鼠大脑皮层神经网络，GFP

来自：Pro. Guo Hui, 中南大学，中国

▲ 图 2.果蝇大脑

来自：Rohan Chippalkatti, 细胞生物学研究所，瑞士

▲ 图 3.C2C12 细胞，品红色核结构支持蛋白 lamin B，蓝色 Hoechst：细胞核，黄色 γH2AX：DNA 损伤，

63X/1.4 油镜，样品厚度 17.47 µm

来自：Dr. Lucas Smith, 加州大学戴维斯分校，美国

▲ 视频 1.小鼠肺组织切片：I 型肺泡上皮细胞（AT1）染色，GFP 示踪 AT1 细胞系（黄色），RAGE 糖基化产物（品红色）AQP5 水通道蛋白（灰色），DAPI-细胞核（蓝色）

来自：Yana Kazadaeva，加州，美国

▲ 图 4.鼠视网膜：绿色抗-CD31：视网膜细胞，红色 IsoB4：血管，蓝色抗-GFAP：星形胶质细胞

来自：Dr. Jeremy Burton & Jiyeon Lee, Genentech Inc.,美国

▲ 视频 2.转基因果蝇眼睛 ninaE-EGFP 光感受器

来自：Navid Nouri, Genentech Inc., 美国

▲ 图 5.上图为普通宽场显微镜，下图为 THUNDER 结果

40x/1.3 PLAN APO 油镜

来自：Michael Piacentino，加州理工学院，美国

▲ 视频 3.成鼠卵巢，anti-NOBOX 标记，优化的 3DISCO 方法透明化处理组织

10X/0.32 物镜，4 视野拼接，586 µm Z 轴层扫

来自：Drs. Diana Laird & Bikem Soygur, 加州大学，美国

▲ 图 6.鼠原代细胞培养的细胞球

品红色 Cy5：β-Ⅲ 微管，红色 Rhod：NG2 蛋白，绿色 GFP：巢蛋白，蓝色 DAPI

来自：Louise Bertrand, Leica Microsystems­

▲ 图 7.荧光素染色植物纤维以研究其动态和气孔变化

130 µm 55 层 Z 轴层扫

来自：Mollie Smoak, 莱斯大学，美国

▲ 图 8.成鼠晶状体纵向切片，显示出纤维晶状体细胞的结构 (绿色，β 连环蛋白抗体(BDB610153))， Afadin (红色，丝状肌动蛋白结合抗体(PA1-25076)

来自：Dr. Nathalie Houssin, 俄亥俄州立大学，美国

▲ 图 9.草履虫。表膜蛋白（GFP，红色显示），β-微管蛋白（Alexa 568，绿色显示）

来自：Anne Aubusson-Fleury, CNRS, Gif-sur-Yvette，法国

THUNDER 细胞培养和活细胞的结果分享到此，下期小编将为您展示 THUNDER 在模式动物研究中呈现的惊喜。

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