2019-12-03 13:20:56 美谷分子仪器(上海)有限公司
本周日就是父亲节啦,在这里,美谷小编提前祝各位爸爸们节日快乐!作为父亲,无论孩子身处哪个年龄阶段,都会希望孩子能多接触新鲜事物,勇于尝试并开阔眼界。同样,美谷分子仪器一直以创新的姿态为用户们提供新的检测技术视野。下面,我们就来介绍一种新的Western Blot检测方法。
多种技术手段均可用于检测Western Blot膜上的蛋白,包括荧光和化学发光,然而,每种技术均有其局限性,我们需要持续改进其定量的准确性和动态学范围。这里我们介绍一种全新利用铕元素标记二抗ScanLater Western Blot检测系统。这种全新技术能够提高检测动态学范围、降低背景信号,此外其技术优势还体现在结果稳定性上,膜上蛋白多次及重复进行检测均不会影响其真实信号值。
ScanLater Western Blot检测原理
灵敏度和动态学范围
使用标记有GST(谷胱甘肽S-转移酶)来检测ScanLater系统的灵敏度和动态学范围,将GST三倍关系进行倍比稀释于1X缓冲液中,将其加入4-20%梯度胶中跑30分钟。蛋白转印至荧光型膜上,然后用生物素标记的兔抗GST抗体孵育2小时,随后将其与ScanLater铕元素标记亲和素的二抗中继续孵育1小时。膜清洗、干燥后使用SpectraMax Paradigm多功能微孔板读板机扫描其荧光信号值。我们可以看到其针对GST的检测灵敏度可以达到飞克级别,动态学范围可以达到四个数量级以上。
信号的稳定性
我们可以看出铕元素标记的抗体具有的信号稳定性和抗光漂白性的优势。膜上的荧光信号经过数月后依然很稳定。(如下图)。
荧光信号能如此霸气稳定数月之久,小伙伴们是否惊呆了?!
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