利用LC-MS/MS同时测定细胞培养基/上清液中106种化合物

2019-08-01 16:38:56 SCIEX

1955年，Eagle博士发布了细胞基础培养基配方，指出培养基是“一个包含无机盐、糖、氨基酸、维生素及其他必须营养物质的等渗透压且具有pH缓冲能力的混合物”。作为细胞生长的环境和营养物质来源，对培养基的组成成分、投料化合物含量配比及其在细胞培养过程中含量变化进行检测具有重要意义。因此，几乎所有的生物制药公司、培养基生产商都不同程度的投入了大量的人力和物力开发培养基重要成分的检测方法。但是，目前培养基成分的检测过于复杂，需要使用不同的仪器、不同的方法进行测定，已不能满足工业化快速、标准化要求。而液质联用技术具有高通量，专属性强的特点，就能很好的解决这个问题。

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因此， SCIEX公司推出了一针进样检测的“细胞培养基/上清液成分分析解决方案”。

首先该方法采用正负切换模式、一针进样即可在20分钟内实现细胞培养基/上清液中6种糖、39种氨基酸、19种维生素、18种核苷酸以及其他24种代谢相关物质共106种化合物的同时分析。

其次，该方法为内标绝对定量方法，可获得长时间跨度的投料化合物样本的绝对浓度，易于比较；在没有标准品的情况下，也可将该方法应用于短时间或同批次样本的相对定量研究。

最后，SCIEX独有的Scheduled MRM^TM模式，保证了所有化合物具有足够的扫描点数，从而保证峰形和灵敏度，方便增加更多的化合物。

细胞培养基/上清液成分分析解决方案优势

原有细胞上清液监测难点	SCIEX LC-MS/MS解决方案特点	SCIEX解决方案价值
多种仪器分别检测多类化合物	MRM模式，高专属性，一种仪器检测多类化合物	大大提升了单个方法检测化合物的数量
方法开发耗时耗力	106个化合物方法包，无需再进行方法开发	简化方法开发的时间，方法高重现性，拿来即用
需要衍生化反应等复杂的前处理	灵敏度高，前处理简单，稀释进样	简化了前处理步骤，节省前处理时间
检测时间长	正负切换，一针进样，仅需20 min	节省分析时间，快速拿到检测结果
基质复杂干扰目标化合物准确定量	标准品确定化合物保留时间，采用Scheduled MRM^TM模式检测，避免共流出物的干扰	大大提升了化合物定量的准确性
增加化合物需要重新开发方法	Scheduled MRM^TM模式检测，方便后期根据需求增减化合物个数	方法具有延续性，可加入新关注化合物，不断丰富现有方法
难以满足多类化合物长时间准确定量	内标绝对定量方法	一种方法满足绝对定量和相对定量需求