“水”的学问这么多，你get到多少？

1 仪器设备及试剂

1.1 仪器设备

Sepaths UP-6 柱膜通用全自动固相萃取系统（莱伯泰科公司）；

IFAD 干燥除水装置（莱伯泰科公司）；

安捷伦7890B-5977B 气质联用仪（安捷伦公司）；

萃取柱：LabTech HLB 500mg 6mL（莱伯泰科公司）

1.2 试剂

丙酮，甲醇，二氯甲烷，正己烷（色谱纯 FISHER Chemical）；

乙酸乙酯（农残级，CNW）；

五氟苄基溴（百灵威科技）；

五氟苄基溴衍生试剂：称取0.500g五氟苄基溴，溶于9.5mL丙酮中，4℃下避光冷藏，可保存2周；

0.05mol/L盐酸溶液：量取0.44mL浓盐酸，缓慢加入到100mL水中；

硫酸溶液：量取50mL浓硫酸，缓慢加入到50mL水中；

0.1g/mL K2CO3 溶液：称取1.0g K2CO3 溶于水中，定容至10.0mL；

酚类标准储备液：异丙醇中14种酚类混合，100ug/mL，国家标准物质；

酚类标准工作液：取1mL 100μg/mL的标样储备液与10mL的容量瓶中，用丙酮定容，得到浓度为10μg/mL的标样工作液。

2 实验过程

2.1 样品准备

取水样250mL ，加入硫酸溶液，调节pH值≤1。

2.2 固相萃取

按照图1所示的方法进行Sepaths UP方法编辑，并加载方法到相应通道，运行方法对2.1中准备的样品进行固相萃取。收集到的萃取液，使用IFAD除水装置进行除水。将除水后的萃取液于40℃下，氮吹浓缩至0.5mL，再用丙酮定容至8mL 。

图1 水中14种酚类的固相萃取方法

2.3 衍生化反应

在8mL上述丙酮萃取浓缩液（2.2）中依次加入100μL五氟苄基溴衍生化试剂和100μL K2CO3 溶液。盖好瓶塞，轻轻振摇、混匀。置于60℃下衍生60min后，冷却至室温。再在40℃下，氮吹浓缩至0.5mL，用正己烷定容至1.0mL，待测。

2.4 加标样品处理

在2.1样品准备过程中，加入50μL的酚类标准工作液（10μg/mL），混匀后，再按2.2和2.3的步骤对加标样品进行处理。样品的加标浓度为2μg/mL。

2.5 GC-MS气质联用仪检测条件

2.5.1 气相条件

色谱柱：HP-5ms  30m*0.25mm*0.25μm；

进样口温度：270℃，不分流进样；

柱流速：1mL/min（恒流）；

进样量：1μL；

柱箱温度：50℃，以8℃/min升温至250℃并保持10min。

2.5.2 质谱条件

四极杆温度：150℃；离子源温度：230℃；传输线温度：290℃；

扫描模式：选择离子扫描（SIM），酚类化合物衍生物（如苯酚五氟苄基溴衍生物简称为苯酚-PFB）的主要特征离子参见表1；溶剂延迟时间：12min。

表 1 酚类化合物衍生物的出峰顺序及主要特征离子

注：加*号的离子为酚类化合物五氟苄基溴衍生物定量离子。

3 实验结果

3.1 14种酚类标样衍生化合物SIM图

图2为14种酚类标样衍生后的化合物SIM图。

3.2 空白样品SIM图

图3为空白样品SIM图，在14种酚类的相对位置处没有检出。

3.3 加标样品SIM色谱图

图4为加标样品的SIM图。

3.4 加标回收率结果

表2为加标回收率结果，6个平行样的回收率在73.1%~121.4%，RSD 7.6%~12.2%。

表2 加标回收率结果

4 结果与讨论

本实验按照HJ 744-2015水质酚类化合物的测定气相色谱-质谱法，使用Labtech Sepaths UP-6 柱膜通用全自动固相萃取系统对水中14种酚类化合物进行了富集萃取，并用GCMS气质联用仪进行检测。本实验的回收率为73.1%~121.4%，RSD 7.6%~12.2%。Labtech Sepaths UP-6 柱膜通用全自动固相萃取系统可以完全胜任水中酚类化合物检测方法中的固相萃取工作，实现了全自动过程，提高了整体实验效率。

参考标准

1、HJ 744-2015水质 酚类化合物的测定气相色谱-质谱法