2019-02-13 14:56:12, Waters 沃特世科技(上海)有限公司
在过去十年中,分离科学最大的成就之一就是超高效液相色谱的推出,即我们熟知的UPLC。现在越来越多的用户在UPLC使用体验中收获着丰硕的成果。今年,我们将就UPLC系统的常见故障和用户水平操作为大家带来一系列技术文章,欢迎大家持续关注!
本次,我们将向大家介绍常用UPLC系统各管路的作用以及如何合理放置这些管路。
1.1 H-Class ( QSM ) 流动相进口管路:四根白色管路并有彩色标签注明Solvent A — Solvent D。
溶剂管标签 | 溶剂管标签颜色 |
A | 黄色 |
B | 蓝色 |
C | 红色 |
D | 绿色 |
1.2 ACQUITY UPLC ( BSM ) 流动相进口管路:四根白色管路并有彩色标签注明 A1/A2/B1/B2。
溶剂管标签 | 溶剂管标签颜色 |
A1 | 黄色 |
A2 | 蓝色 |
B1 | 红色 |
B2 | 绿色 |
流动相的进口管路,应放入实验用的流动相瓶内。注意: 管路上的金属溶剂过滤头一定浸没在液面以下,以确保可以正常的吸取流动相。
对于不常使用的溶剂管路一定要放在高比例的有机相或纯有机相瓶中,以防止溶剂长菌而污染管路。
1.3 柱塞密封清洗进口管:一根白色管路并有棕色标签注明SW。
这是柱塞密封清洗(泵头清洗)的进口管路。它的作用是清洗泵头部分在运行含盐流动相产生的盐溶液的残留,防止结晶,最大程度地润滑及保护泵头。使用仪器时,请将柱塞密封清洗溶剂瓶放置在仪器上部的溶剂托盘内。
柱塞密封清洗建议使用能够完全溶解含盐流动相的溶剂。对于常用的反相HPLC应用,使用包含一定量有机相的水溶液可以抑制细菌生长,但要保证可以完全溶解流动相的盐溶液。 例如,根据不同的应用使用 80% 水/20% 甲醇的溶液或 80% 水/20% 乙腈的溶液。(柱塞密封清洗液因流动相的改变而发生变化,并非固定类型的溶剂。)
2.1 清洗溶剂管路:白色英文标签注明Sample Manager Wash
它的作用是清洗进样针,防止样品间的交叉污染。故建议使用能够完全溶解样品的溶液作为洗针液,因样品溶解性的差异,不同的测试样品应会需要不同的洗针液。该溶剂是不进入进样流路的。
通常可以使用高比例的有机相做为清洗溶剂。
2.2 清除溶剂管路:橙色英文标签注明 Sample Manager Purge
它的作用是清洗进样注射器和部分进样器管线,该溶剂是不进入进样流路的,(只有做为稀释剂时才会进入进样流路)。
通常可以使用低比例的有机相做为清除溶剂。
2.3 强洗溶剂管路:白色英文标签注明Strong Solvents
它的作用是清洗进样针,防止样品间的交叉污染。故建议使用能够完全溶解样品的溶液作为强洗液,因样品溶解性的差异,不同的测试样品应会需要不同的洗针液。该溶剂是不进入进样流路的。
通常它可以使用高比例的有机相做为强洗溶剂,可以高于梯度洗脱中强溶剂的比例。
2.4 弱洗溶剂管路:棕色英文标注是Weak Solvents
它的作用是清洗进样针和进样部分以及置换掉强洗溶剂,来防止样品间的交叉污染。故建议使用能够完全溶解样品的溶液作为弱洗液,因该溶剂是保留在样品环内并随样品一同进入色谱系统,故不同的测试样品应需要不同的弱洗液。
通常它可以使用低比例的有机相做为弱洗溶剂,可以等于(或低于)梯度洗脱中弱溶剂的比例。
3.1 无论是ACQUITY UPLC,还是H-Class,它们的出口管路都会汇集在泵的右前角,再由一根半透明的废液管把废液靠其重力作用导流到废液瓶内。
故要求该外置废液管尽可能直接和垂直的连接到废液瓶,不要有任何缠侥,以免废液流出不畅。
3.2 下图中的黄色乳胶管,是仪器脱气机的排气管,不可放入废液瓶内,以防止废液堵塞出气口而影响脱气机正常工作。还要防止因弯折造成排气管堵塞。
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