易肽 PNGase F 糖苷酶

货号：OSFP-PNGF | 规格：100,000 units/200μl/管

产品说明

PNGase F糖苷酶是一种酰胺水解酶，特异性的切割糖蛋白上的N-连接糖，切割的糖型包括高甘露糖、杂合和复杂寡糖。切割位点为最内侧的N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之间。

易肽 PNGase F糖苷酶可从糖肽/糖蛋白中水解几乎所有类型的N-糖链。

注意：当α1–6岩藻糖位于GlcNAc核心时，PNGase F可以切割；但当α1-3岩藻糖位于GlcNAc核心时，则不能切割。这种修饰常见于植物和部分昆虫糖蛋白。

产品状态与储存条件

性状：透明澄清液体

Buffer成分：10 mM Tris-HCl (pH 7.4)，100 mM NaCl，5 mM EDTA，无甘油

储存条件：4℃，12个月内稳定保存

使用方法

推荐使用条件如下：

1-20 μg变性糖蛋白样品

加入50 mM碳酸氢铵至终体积为2 μl

加入1 μl PNGase F混匀

37℃反应1-3小时

非变性条件下酶切：反应时间延长至12-24小时。

在变性条件下使用含SDS和DTT的缓冲液时，由于SDS抑制PNGase F活性，需在反应体系中加入NP-40以恢复酶活性。

酶活性与质量控制

项目	参数
分子量	约37 kDa
标签	N端His标签
纯度	>95%
比活性	500,000 units/ml
酶活定义	1个酶活力单位指在10 μl反应体系中，37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。
质检图

反应条件建议

pH值：PNGase F在pH 7.5左右活性最高

温度：最适反应温度为37℃

反应时间：合理控制酶解时间，避免过度酶解

应用示例

通过PNGase F处理糖基化RNase B后，可观察到糖链去除后的去糖基化条带：

glycosylated RNase B → deglycosylated RNase B

通过SDS-PAGE或质谱分析可验证酶切效果。