蛋白印迹仪Milo单细胞蛋白质表达定量分析系统Milo SCIENCE ADVANCES：单细胞Western揭秘胚胎发育异质性(ProteinSimple)

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近日，美国加利福尼亚大学伯克利分校的科学家，利用单细胞Western技术在期刊SCIENCE ADVANCES（IF：12.804）发表文章：Assessing heterogeneity among single embryos and single blastomeres using open microfluidic design, Sci. Adv. 2020; 6: eaay1751 22 April 2020.

因为Milo对单细胞蛋白质表达分析的独特优势，在7月份上市之后，连续获得了MIT technology review 年度创新奖，美国著名杂志 The Scientist 年度创新产品第一名。

 Milo具有极其强大的功能：

 1. 单张芯片可进行1000-2000个单细胞western blot检测

 2. 单个细胞可进行数十个靶蛋白检测

 3. 仅需使用western blot验证抗体

 4. 基于western blot技术，蛋白质分离后检测，提高免疫学检测特异性

 5. 全程检测4-6小时

 6. 适用于：细胞异质性研究及稀缺样本检测。

 7. 循环肿瘤细胞，外泌体检测

参考文献：

       1. Microfluidic Western blotting，PNAS，December 26, 2012， vol. 109 ，no. 52，21450–21455

             2.  Single-Cell Western Blotting after Whole-Cell Imaging to Assess Cancer Chemotherapeutic 

                 Response， Anal. Chem. 2014, 86, 10429?10436

             3.  Single-cell western blotting，Nature methods，11, 749–755 (2014) doi:10.1038/nmeth.2992 
             4.  Hydrogel Pore-Size Modulation for Enhanced Single-Cell Western Blotting，Adv. Mater. 2016, 28,  

                  327 –334

             5.   Single cell–resolution western blotting，1508 | VOL.11 NO.8 | 2016 | Nature protocols

             6.  Profiling protein expression in circulating tumour cells using microfluidic western blotting， NATURE COMMUNICATIONS | 8:14622 |

                  DOI: 10.1038/ncomms14622 |www.nature.com/naturecommunications

            7.  Construction of developmental lineage relationships in the mouse mammary gland by single-cell RNA profiling，NATURE

                  COMMUNICATIONS | 8: 1627 | DOI: 10.1038/s41467****** | www.nature.com/naturecommunications 3

胞异质性存在于生命医学研究的各个领域，包括肿瘤学，干细胞分化发育，免疫学等。重大生命医学问题的解决，必须首先解决细胞异质性的问题。

通过单细胞检测技术，对异质性细胞进行分类，是细胞异质性分析的主要手段。单细胞测序技术实在基因层面的单细胞分析，但是所有生物学效应，包括生理学效应，病理学效应，药物反应等，zei后都是通过特定蛋白质来发生和调控的。

Milo单细胞蛋白质表达定量分析系统，技术来源自美国著名大学加州大学伯克利分校Amy E. Herr教授实验室，该实验2014年原创性技术发表在Nature Method，题目Single cell western blot。ProteinSimple借助强大的软件及硬件研发实力，将其开发为单细胞蛋白质表达定量检测系统，用于细胞异质性及稀缺细胞样本（比如循环肿瘤细胞等）研究。

检测流程

Milo单细胞蛋白质定量表达分析系统，是第一款单细胞水平，蛋白质表达定量分析系统。Milo系统采用专利的微流控western blot芯片，通过单细胞微孔设计，采集单细胞，然后原位裂解细胞，释放蛋白，进行蛋白质电泳，将不同分子量蛋白进行分离，提高免疫学检测特异性。之后，采用专利技术进行蛋白质原位捕获，使用western blot验证抗体及荧光标记二抗直接杂交，扫描仪进行芯片扫描后，Scout软件对扫描结果进行深度定量分析。

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