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背景介绍
酵母表达系统兼有原核和高等真核系统的优点,培养条件简单、生长速度快、表达水平高、操作简便、成本低廉,蛋白翻译后能进行正确加工、修饰,合理的空间折叠,使得蛋白的可溶性得到提高,是理想的重组真核蛋白生产制备工具。
安必奇具有丰富的酵母蛋白表达的经验,成功表达出超过100种重组蛋白。并且我们具有筛选酵母表达高拷贝菌株的服务,可以满足客户的多种特殊需求。我们利用酵母表达系统成功表达过具有二硫键蛋白及糖基化蛋白,使蛋白具有类似天然的结构和翻译后修饰,保证了蛋白的活性。
酵母系统表达的过程中,对诱导时间及温度的控制,对培养条件和菌株生长周期的把握直接影响到重组蛋白表达的成败,安必奇的技术人员对整合流程把握和控制,提高表达的成功率及表达水平。
服务优势·高生产率:独特的分泌信号序列保证了重组蛋白的大分泌量。·两种表达体系可供选择:可选择组成性表达或者诱导表达两种体系。·大规模生产:高达500L的生物反应器保证克级水平蛋白的生产。·多种菌株和载体可供选择:我们提供包括X33, GS115, SMD1168等多种菌株和多种载体。
服务项目及流程
密码子优化安必奇的密码子优化技术,涉及基因合成、载体构建、基因保证转录、mRNA翻译、翻译后修饰等环节。
重组酵母表达质粒构建、目的基因的亚克隆和重组质粒电转化进入表达菌株
鉴定筛选高表达菌株通过PCR方法确定阳性转化株, SDS-PAGE电泳检测培养上清中目标蛋白的表达情况,并挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。
蛋白表达分析鉴定。
蛋白表达条件的优化。挑选阳性克隆进行常规表达筛选,并对其中表达最好的菌株优化表达条件。对挑选出来的单克隆菌株,优化培养及诱导条件(培养基,菌体密度,甲醇浓度,诱导时间等),提高目标蛋白的表达量。
大规模蛋白表达和纯化。
蛋白鉴定。利用定性或者定量分析的方法进行蛋白质鉴定。
酵母表达系统,酵母表达系统
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