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CRISPR/Cas9打靶基因后引入的突变的方式与ZFN、TALEN基本一致,都是NHEJ或是HR。因此在CRISPR/Cas9的应用中,活性检测或是突变效率的检测可以参照ZFN和TALEN方法.主要包括有:靶位点直接PCR后TA克隆测序和基于可以识别错配双链的错配内切酶检测法(Surveyor法)。 Surveyor法即错配酶法:靶序列经CAS/sgRNA切割后由于缺乏修复模板,将主要以非同源重组的方式进行修复,或多或少会插入或删除一些碱基。因此将靶序列PCR扩增后经变性、退火,将形成错配。错配酶(主要是CEL1或T7E1酶)将识别错配的杂合双链并剪切。产物跑电泳,比较切割条带与未切割条带的比例,即可反映出Cas/sgRNA的活性。 Biomics CRISPR相关服务链接如下: 1) 设计sgRNA序列 http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10644 2) sgRNA表达载体构建 http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10645 3) sgRNA体外合成 http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10647 4) 全基因组sgRNA文库的构建 http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10646 5) sgRNA活性检测 http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10648 6) Surveyor法及测序验证 http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10649 7) 稳定表达Cas9蛋白细胞株筛选 http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10650 8) 利用CRISPR系统进行基因重组donor质粒构建 http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10651 Biomics相关产品链接: 1) Precut pSG-target Cloning kit & SSA assay http://www.bioon.com.cn/reagent/Show_product.asp?id=3077961 2) Different type cas9 expression plasmid http://www.bioon.com.cn/reagent/Show_product.asp?id=3077958 3) sgRNA MICscriptTM KIT/sgRNA synthesis product CRISPR /Cas9专家系统服务-Surveyor法及测序验证, CRISPR /Cas9专家系统服务-Surveyor法及测序验证信息由百奥迈科生物技术有限公司为您提供,如您想了解更多关于CRISPR /Cas9专家系统服务-Surveyor法及测序验证报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。
CRISPR/Cas9打靶基因后引入的突变的方式与ZFN、TALEN基本一致,都是NHEJ或是HR。因此在CRISPR/Cas9的应用中,活性检测或是突变效率的检测可以参照ZFN和TALEN方法.主要包括有:靶位点直接PCR后TA克隆测序和基于可以识别错配双链的错配内切酶检测法(Surveyor法)。
Surveyor法即错配酶法:靶序列经CAS/sgRNA切割后由于缺乏修复模板,将主要以非同源重组的方式进行修复,或多或少会插入或删除一些碱基。因此将靶序列PCR扩增后经变性、退火,将形成错配。错配酶(主要是CEL1或T7E1酶)将识别错配的杂合双链并剪切。产物跑电泳,比较切割条带与未切割条带的比例,即可反映出Cas/sgRNA的活性。
Biomics CRISPR相关服务链接如下: 1) 设计sgRNA序列 http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10644 2) sgRNA表达载体构建 http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10645 3) sgRNA体外合成 http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10647 4) 全基因组sgRNA文库的构建 http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10646 5) sgRNA活性检测 http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10648 6) Surveyor法及测序验证 http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10649 7) 稳定表达Cas9蛋白细胞株筛选 http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10650 8) 利用CRISPR系统进行基因重组donor质粒构建 http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10651 Biomics相关产品链接: 1) Precut pSG-target Cloning kit & SSA assay http://www.bioon.com.cn/reagent/Show_product.asp?id=3077961 2) Different type cas9 expression plasmid http://www.bioon.com.cn/reagent/Show_product.asp?id=3077958 3) sgRNA MICscriptTM KIT/sgRNA synthesis product CRISPR /Cas9专家系统服务-Surveyor法及测序验证, CRISPR /Cas9专家系统服务-Surveyor法及测序验证信息由百奥迈科生物技术有限公司为您提供,如您想了解更多关于CRISPR /Cas9专家系统服务-Surveyor法及测序验证报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。
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http://www.bioon.com.cn/server/Show_product.asp?id=10644
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