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AP-MS
与常规Co-IP实验类似,只是亲和纯化法可不用引入抗体。将标签(如SBP)与特定基因融合表达,融合蛋白用链霉亲和素(strep)磁珠亲和纯化,经生物素洗脱,即可得到蛋白复合物。将实验组和对照组的洗脱蛋白分别做质谱,在实验组结果中扣除对照组中的蛋白,即可鉴定出与靶蛋白互作的蛋白。
技术优势:
· 鉴定的互作蛋白是体内与诱饵蛋白天然互作的,更接近体内生理状态;
· 只经一步亲和纯化,与诱饵蛋白有弱相互作用的蛋白也可能被鉴定到。
实验流程:
客户提供:
·诱饵基因的信息(名称、物种或ID等)或者提供诱饵基因的cDNA模版
·待研究细胞及相关的培养信息。
结果交付:
· 构建好的真核表达载体
· 实验组和对照组蛋白的质谱鉴定结果
· 标准实验报告
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