蛋白表达纯化/多肽合成/多肽标记
蛋白质表达纯化
随着蛋白药物市场的快速发展和蛋白质组学研究的深入,高纯度活性蛋白的需求越来越大。威斯腾生物中心组建了一支由多名具深厚生物技术基础与制药企业工作经验的留学归国人员和国内专家为核心的团队。可为国内外客户提供从基因到蛋白纯化的整套技术服务。
威斯腾服务特色
稳定而多样的表达系统:威斯腾生物已建立整套的基因克隆与表达体系,无论是单个基因的克隆、表达与纯化,还是多个基因高通量的基因克隆、表达和纯化,均能选用适合您试验(科研项目)需要的表达系统和合适的表达载体为您提供优质的服务。
多种纯化方式:可为客户提供多种蛋白纯化服务,纯化方式包括亲和层析纯化、凝胶过滤、离子交换、疏水层析等,客户可根据需要选择合适的纯化方式。
专业的团队和良好的信息管理体系:专业的基因克隆、蛋白表达与纯化技术人员与团队,具有丰富的表达和纯化经验,可为客户解决各种瓶颈问题, 良好信息管理体系使我们能够为客户提供成熟、高效的基因克隆服务。
操作流程
大肠杆菌和酵母蛋白表达系统:
合成基因(另外收费)或者客户提供
SDS-PAGE检测表达
Western blot检测表达(可选)模板(cDNA、基因组DNA、质粒等)
构建表达载体
筛选阳性克隆
表达优化和可溶性分析
提供结果
1、构建的表达载体及测序报告
2、SDS-PAGE结果
3、筛选的表达菌株
4、Western blot结果
5、实验流程及结果
6、2ml 1.0×108pfu/ml的病毒(利用昆虫杆状病毒蛋白表达系统表达时)
稳定表达细胞株(哺乳动物细胞)
多肽合成
威斯腾生物合成多肽采用逐步固相合成方法服务,利用微波技术处理反应体系,可以合成较长的复杂多肽。多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程,多肽的一个末端固定在特殊支持物上,通过循环步骤最终形成一条完整的多肽。
肽链的设计:
多肽是复杂的大分子,每条序列在物理和化学特性上都是独特的,研究人员设计多肽时应考虑到合成,纯化以及溶解等过程中的难度,从而能够使用该多肽达到自己的实验目的。
如何降低肽链合成的难度:
减少序列长度
减少疏水性残基数
减少困难残基
如何增强肽链的可溶性:
改变N端或C端
缩短或加长序列
加入可溶性残基
通过置换一个或多个残基改变序列
通过选用不同框架来改变序列
多肽保存:
冻干多肽可在-20度保存或室温保存
溶液肽远比冻干形式不稳定,溶液应为中性PH(5-7)-20度保存。
为避免样品的反复冻融,最好分成小样存放。
多肽的溶解:
大多数多肽的首选溶剂是超纯抽气水,稀乙酸或氨水分别对碱性或酸性多肽的溶解也有帮助。如果这些方法用过后还不溶解的多肽,建议用DMF,脲,guanidiniam,chloride,acetonitnle来溶解。
多肽的用途:
主要用于抗体的制备,多肽疫苗,多肽微注射剂对基因结构与功能关系的研究。本中心提供不同纯度的多肽,多粗提产物到98%的医药级别,客户可根据需求进行选择。
>80% :免疫学应用,多克隆抗体制备
>90%:SAR研究,生物测定
>95%:NMR,结晶化,体外生物测定
>98%:NMR,结晶化,敏感的生物测定
服务范围:
1)普通线性肽,链长至189个氨基酸,毫克至克级,纯度可达99%
2)简单修饰肽:免费提供N端乙酰化,末端酰胺化
3)复杂修饰肽:脂肽,***酸肽(Ser、Thr、Tyr),环肽(酰胺环、二硫键环),荧光标记肽(FAM、FITC),生物素标记肽(BIOTIN)、复合抗原肽(MAP)等 ┄
4)蛋白交联:KLH,BSA,OVA
5)含特殊氨基酸肽:含有D型氨基酸及各种氨基酸衍生物
6)不同纯度范围(粗肽、>70%、>80%、>90%、>95%、>98%、>99%)
多肽标记
提供同位素、荧光标记、生物素标记
威斯腾实验服务流程
威斯腾生物服务项目
分子生物学检测 | 蛋白质与免疫学 | 动物实验 |
实时荧光定量PCR | 单克隆抗体制备 | 帕金森疾病模型 |
免疫共沉淀(Co-IP) | 多克隆抗体制备 | 抑郁症动物模型 |
ELISA(酶联免疫吸附法)技术 | Western-blot 实验服务 | 脊髓损伤模型 |
生化指标检测 | 蛋白双向电泳实验服务 | 脑外损伤模型 |
双荧光素酶报告基因检测 | 原核蛋白表达纯化 | 骨神经损伤模型 |
染色质免疫共沉淀(ChIP) | 真核蛋白表达纯化 | 心肌缺血模型 |
GST pull Down | ITRAQ定量蛋白质组学 | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白组学 | 肺动脉高血压动物模型 |
|
| 高血压模型 |
病毒包装 | 实验课题整体外包 | 粥样动脉硬化模型 |
过表达/干扰慢病毒包装纯化 | 整体课题外包 | 大脑中动脉阻塞模型 |
过表达/干扰腺病毒包装纯化 | 细胞整体实验外包 | 慢性之气管炎模型 |
逆转录病毒包装纯化 | 动物整体实验外包 | 过敏性哮喘模型 |
腺相关病毒包装纯化 |
| 肺炎大鼠模型 |
|
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 |
蛋白芯片 | 原代细胞培养 | 肝纤维化模型 |
细胞因子芯片 | 骨髓间充质干细胞培养 | 胆结石模型 |
BioPlex悬浮芯片 | 脂肪干细胞培养 | 急性胰腺炎模型 |
生长因子芯片 | 心肌成纤维细胞培养 | 急性肾衰竭模型 |
炎症因子芯片 | 软骨细胞培养 | 体内血栓模型 |
血管生成因子芯片 | 血管内皮细胞培养 | 关节炎模型 |
凋亡因子芯片 | 神经元细胞培养 | I型和II型糖尿病模型 |
趋化因子芯片 | 内皮组细胞原代培养 | 裸鼠成瘤 |
HuProt TM 20K人类蛋白组芯片 |
| 基因编辑动物 |
| 电生理相关服务 | 动物整体实验服务 |
| 膜片钳实验 |
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细胞生物学检测 | 高通量测序 | 代谢组学 |
细胞原代培养 | mRNA测序 | 气相色谱GC/MS |
MTT检测 | LncRNA测序 | 液相色谱LC/MS |
细胞凋亡检测 | 全基因组测序 | 核磁共震NMR |
细胞周期检测 | RNA-Seq测序 |
|
细胞克隆形成实验 | 外显子测序 | 影像学相关实验 |
Transwell细胞迁移/侵袭 | 16s扩增子测序 | Micro-CT |
流式分选 | Small RNA测序 | 小动物活体成像 |
CCK8/XTT检测 | 宏基因组测序 | 核磁共振 |
台盼蓝检测细胞活性 | 单细胞测序 | PET-CT |
药物筛选细胞学实验 | circleRNA测序 |
|
细胞粘附性检测 | 甲基化测序 | 基因编辑动物 |
细胞划痕实验 |
| 条件性敲除小鼠/大鼠 |
细胞生物学整体实验 |
| 全基因敲除小鼠/大鼠 |
细胞成管实验 |
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病理检测 | CRISPR/Cas9细胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
扫描电镜 | 基因定点突变细胞系 | LncRNA芯片 |
透射电镜 | 单基因敲除细胞系 | miRNA芯片 |
HE染色 | 多基因敲除细胞系 | mRNA芯片 |
免疫组化 | 目的基因敲入细胞系 | 甲基化芯片(限人和小鼠来源样本) |
Tunel(原位末端凋亡法)检测 | 报告基因敲入细胞系 | SNP芯片(限人和小鼠来源样本) |
激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除细胞系 |
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免疫荧光 |
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Masson染色 | CRISPR/Cas9动物敲除/敲入 | 科研设计指导&文章评估/润色 |
原位杂交 | 基因敲除大鼠/小鼠 | 科研文献论著翻译 |
荧光原位杂交 | 基因敲入大鼠/小鼠 | 论文翻译润色服务 |
特殊染色(PSA、茜素红、阿尔新蓝等) |
| 临床实验/科研实验设计方案指导 |
行为学检测 | 药物筛选服务项目 | 药效学评价 |
旷场实验 | 高通量自动药物筛选平台 | 抗肿瘤药物药效学评价 |
重复性刻板行为检测 | 细胞高内涵药物筛选平台 | 心血管系统药物药效学评价 |
动物跑台检测 | 蛋白质组学靶标研发平台 | 泌尿系统药物药效学评价 |
强迫游泳 | 分子药理研究平台 | 内分泌系统药物药效学评价 |
| 生物膜片钳药物筛选平台 | 抗炎免疫药物药效学评价 |
| 常规药物体外筛选 |
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【本平台合作项目】
分子生物学、细胞生物学、病理染色检测、细胞敲除&敲入、模式与转基因动物、SPF动物保种、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、SiRNA与纳米载药、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务!
蛋白表达纯化/多肽合成/多肽标记,蛋白表达纯化/多肽合成/多肽标记
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