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细胞分离实验
实验内容:
该实验室通过检测2个细胞分开或是将细胞从基质上移开所需的力量,推算细胞的黏附性。
材料与设备:培养皿、0.02%EDTA、0.25%胰蛋白酶、水平摇床、计数板或计数仪、超净台、孵箱等。
操作步骤:
收集对数期成长的细胞,消化后制备1*10^4个/ml的细胞悬液
取6孔板,每孔加入1ml细胞悬液,置5%CO2培养箱内培养5d
取出培养板,PBS洗涤两次,加入0.02%EDTA溶液1ml,将培养板置于水平摇床上,37’c摇动(每分钟70转)不同时间,如5min,10min,20min等。
收集脱落细胞计数,将未脱落的细胞再加0.25%胰蛋白酶消化,收集计数,各时相点脱落细胞和即为细胞总数。脱落率可按以下公式计算:
细胞脱落率(%)=脱落细胞数/细胞总数*100%
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