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实验介绍:
细胞运动性的研究,尤其在肿瘤细胞的侵袭转移中应用得很广泛。在肿瘤转移过程中共的某些阶段,肿瘤细胞表现出较强的运动能力,如肿瘤细胞从原发瘤灶分离,进而侵入到邻近组织及再穿过血管壁进入血液循环和穿出血管壁进入继发部位等,因而细胞运动性的研究在弄清肿瘤细胞侵袭和转移机制上有重要的位置。
实验原理:
Boyben小室由上、下两个室组成,两室中间由带微孔的滤膜分隔,待测细胞放在上室,其运动性通过测量滤膜上层到运动运动最远的细胞之间的距离而确定。也可以计数在滤膜不同平面上细胞数、滤膜底部的细胞数或是另一张在下室的滤膜上的细胞数。
材料与设备:
无血清的NIH/3T3上清液、Matrigel胶、Boyden小室、棉签、甲醇
操作步骤:
制备无血清的NIH/3T3上清液
包被基底膜
细胞接种
结果统计
最早计数运动的细胞是在200倍光镜下计数移入滤膜不同浓度的肿瘤细胞数目。现在常直接计算膜背面的细胞数作为细胞运动的指标。
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