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单克隆抗体制备技术服务单克隆抗体(单抗)应用淋巴细胞杂交瘤技术将免疫动物的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,通过HAT筛选,ELISA抗体检测,有限稀释克隆化,选择出具有分泌抗体功能又能无限繁殖的来源于单一B细胞的杂交瘤细胞,并产生抗体,就是单克隆抗体。单抗的最大优势是它的特异性、均一性、高效性和无限供应性。在免疫学、医学、生物学等领域的基础研究和临床医学上,包括对疾病(包括癌症)的诊断、预防和治疗等方面,均显示出巨大的生命力。实验步骤:1. 每种抗原免疫5只Balb/c小鼠2. 选取ELISA效价较高的小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合3. 进行2~4次克隆化及ELISA筛选,确保杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性4. 抗体亚类鉴定5. 至少选择2株杂交瘤细胞的冻存,并免费提供一年的保种服务单抗制备标准流程:
抗体的应用:制备的抗体可能用于ELISA、WB、IHC、IP等实验。客户需提供的材料及信息:
客户需要提供2mg以上的纯化蛋白质,纯度≥90%(SDS-PAGE检测),若带融合标签需说明并提供筛选蛋白
如为多肽,客户要提供两种偶联不同蛋白质的多肽各4mg,未偶联多肽1mg,偶联多肽纯度≥85%
结果提供:
实验报告
免疫前血清(20μl)
免疫后血清(20μl)
抗体上清(至少3株,1ml/株)
杂交瘤细胞(3株)
抗体亚型
如需要纯化的客户增加如下结果:纯化抗体(3株)(纯度≥90%,浓度≥1mg/ml,每株5mg) 免疫效价 抗体亲和力常数 相关说明:A、免疫原可以为重组蛋白、天然蛋白、合成多肽、偶联小分子等。B、客户需要承诺外的细胞株,每株价格为500元。C、客户需要对承诺外的细胞株抗体进行纯化,价格为1500元/5mg(单独报价为1800元)。D、如客户需要非IgG类的其他细胞株,每株价格500元,纯化费用500元/5mg(CAAS法纯化)
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