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本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔上预包被链霉素抗原,样本中链霉素和此抗原竞争链霉素抗体(抗试剂),加入酶标二抗(酶标物)与链霉素抗体相结合,经TMB底物显色,样本吸光值与链霉素含量呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样本中链霉素的含量。
适用范围
可定性、定量检测乳品、蜂蜜样中链霉素的含量。
1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25°C)平衡30min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于2~8°C。切勿冷冻。
3、洗涤液在使用前也需回温。
4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、加标准品/样本:加入标准品或样本100μL到对应的微孔中,再加入链霉素酶标物50μL/孔,再加入链霉素抗试剂50μL/孔轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25°C避光环境中反应30min。
6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液250μL/孔,充分洗涤4~5次,每次间隔10s,在吸水纸上拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
7、显色:加入底物液A液50μL/孔,再加入底物液B液50μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25°C避光环境中反应15min。
8、测定:加入终止液50μL/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测,请在5min内读完数据),测定每孔OD值。(若无酶标仪,则不加终止液用目测法可进行判定)。
结果判定
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