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Rotofor® 和小型 Rotofor 等电聚焦仪是通过液相等电聚焦,把蛋白质溶液分为 20 个组分。在纯化的起始阶段,Rotofor 系统可将排除靶蛋白 pI 范围外的蛋白;在最后的步骤,可去除其他方法很难去除的特殊污染物。
因为 Rotofor 可以制备克级的蛋白质,并能根据 pI 有效的把蛋白浓缩到不连续的区域,该仪器被证明是一种有效的富集低丰度蛋白的好方法。运行一次 Rotofor 系统就可使样品浓缩高达 20 倍,将初始运行获得的组分汇集,并通过小型 Rotofor 或 Micro Rotofor 再分离,可以产生最多 1000 倍的纯化效果。在双向电泳应用中,通过等电点进行蛋白质分离可以去除靶蛋白 pI 范围外的蛋白,从而提高样品在极窄范围 IPG 胶条的上样量并提高分离效果。
Rotofor(60 ml 聚焦槽)和 Mini Rotofor(18 ml 聚焦槽)电泳槽是同一系统的不同规格,适用于不同样品量,两种槽的共同特点包括:
可更换的圆柱形聚焦槽 — 可对所选组分进行再分离,进一步提高纯度
保持生物活性
自定义 pH 梯度 — 可使用 Bio-Lyte 两性电解质生成较宽或窄跨度的线性 pH 梯度
一步操作即可把靶蛋白聚焦和富集到 1-2 个组分中
运行 Rotofor 和小型 Rotofor 聚焦仪所需的附件包括:3,000 V 电源(例如 PowerPac™ HV)、冷却循环器、真空源;另外需要使用 Bio-Lyte® 两性电解质形成 pH 梯度。
Rotofor 和 Mini Rotofor 等电聚焦仪,Rotofor 和 Mini Rotofor
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