重组蛋白疫苗做SEC-MALS需要多少样本？

※检测内容

百泰派克生物科技可提供重组蛋白疫苗SEC-MALS分析，通过尺寸排阻色谱与多角度光散射联用，对蛋白样品进行分离和分子量分析，可获得与分子大小及组装状态相关的信息。

※现有样品如何判断是否够用

重组蛋白疫苗做SEC-MALS分析时，样本量不能只看剩余体积。对于已经制备好的蛋白样品，还应同时明确蛋白浓度、实际可分配体积以及此次分析需要观察的主要组分。具体送样量应结合现有样品状态和分析目标确定，不宜用脱离样品条件的统一数值直接套用。

※FAQ

1、重组蛋白疫苗只剩很少体积，还可以做SEC-MALS吗？

体积少本身不能直接决定是否可以分析。还要结合现有蛋白浓度判断实际可用于SEC-MALS的蛋白材料，并确认这些材料是否能够满足计划分析的目标组分。

2、样品浓度高，是不是少量样品就一定够？

不能这样判断。浓度和体积需要同时考虑，实际进样还受到SEC分离条件影响。提高浓度不能替代对可用体积和色谱分离状态的判断。

3、只看主蛋白组分和同时看低比例组分，对样品要求一样吗？

不完全一样。低比例组分在样品中的实际材料量更少，即使主峰具有足够信号，也不能据此判断其他组分同样能够被有效解析。

4、同一份疫苗样品还要做其他表征，SEC-MALS样品怎么留？

应先明确SEC-MALS在当前项目中需要解决的具体问题，再确定能够分配给该分析的材料。若样品有限，不宜仅按多个检测项目平均分配，而忽略不同分析对样品条件的要求。

※对于已经持有重组蛋白疫苗样品、准备开展SEC-MALS分析的项目，现有材料是否足够，可以从浓度、可用体积和需要解析的目标组分进一步判断：

重组蛋白疫苗做SEC-MALS时，样本量不宜只用一个体积或总蛋白量表示。SEC需要先将样品中的不同组分进行分离，随后进入MALS检测，因此实际能否分析与进入系统的目标蛋白材料有关。相同体积下蛋白浓度不同，可用于分析的蛋白量也不同；相同总蛋白量如果浓度和体积组合不同，实际进样条件也会变化。所以“还有多少样品”只是第一层信息。判断够不够，还要把现有材料转换成“有多少可用于SEC-MALS的蛋白样品”，并明确这些材料准备解决哪个分析问题。

图1. 重组蛋白疫苗SEC-MALS样品评估流程

一、先确认现有样品的浓度和可用体积

1、可用体积决定能够分配多少样品给SEC-MALS

对于已经制备好的重组蛋白疫苗样品，应先确认真正能够用于SEC-MALS分析的体积。如果同一份样品还需要保留给其他质量表征，库存总体积不能直接作为SEC-MALS的可用样本量。这也是为什么仅提供“还剩多少微升”通常不足以判断样品是否够用。还需要知道这部分样品对应的蛋白浓度。

2、蛋白浓度决定单位体积中的有效蛋白材料

相同体积的重组蛋白疫苗样品，蛋白浓度不同，实际进入色谱系统的蛋白量也不同。浓度是判断有限体积能否支撑分析的重要信息。

(1) 浓度偏低时

目标组分进入检测系统后的信号可能受到限制。尤其需要观察样品中含量较低的组分时，仅有足够的液体体积并不能说明相应组分一定能够获得可解析信号。

(2) 浓度较高时

浓度较高也不能直接等同于“样品一定够”。实际进样仍需兼顾SEC分离条件，过高的样品负荷可能影响峰形和组分分离，因此样品准备不能单纯通过提高浓度解决。

二、再看此次分析准备观察哪个蛋白组分

1、主要分析主组分时应围绕主峰判断

如果研究目的主要是获得重组蛋白疫苗主要蛋白组分的分子量、大小或组装状态，样品是否足够应围绕该组分经过SEC分离后能否形成可解析的检测信号判断。此时整份样品的总蛋白量并不是唯一指标，因为SEC-MALS分析对象最终落实到实际形成的色谱组分。

2、关注低比例组分时不能只看主峰

如果还希望观察聚集相关组分或其他低比例成分，需要进一步考虑这些组分在整个样品中的占比。某个组分在原样中比例较低，其进入对应色谱峰的实际蛋白材料也会相应减少。主峰能够正常分析，并不能证明所有低比例峰都具有相同的信号条件。

图2. 重组蛋白疫苗SEC-MALS目标组分解析要点

三、样品有限时先明确SEC-MALS要解决什么问题

1、分析目的决定需要保留哪些组分信息

SEC-MALS可用于获得蛋白分子量、大小和组装状态等信息。重组蛋白疫苗项目如果主要关注目标蛋白的分子状态，样本量判断应直接对应这一目标，而不是为了获得更多检测项目而无限扩大样品使用范围。

2、现有材料应按单个项目实际可用量判断

样品较少时，应整理现有蛋白浓度、可用体积以及是否还需分配给其他实验，再确认SEC-MALS计划分析的目标组分。这样得到的才是当前项目真正能够使用的材料量。

重组蛋白疫苗做SEC-MALS需要多少样本，没有脱离蛋白浓度和分析目标即可直接套用的统一数值。判断现有样品是否够用，应同时看可用体积、蛋白浓度和需要解析的目标组分，而不能单独依据库存体积或总蛋白量。百泰派克生物科技可提供重组蛋白疫苗SEC-MALS分析及SEC-MALS分子量检测。如已有重组蛋白疫苗样品，可结合现有蛋白浓度、可用体积和拟分析目标进一步沟通具体项目情况。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

重组蛋白疫苗做SEC-MALS需要多少样本？信息由北京百泰派克生物科技有限公司为您提供，如您想了解更多关于重组蛋白疫苗做SEC-MALS需要多少样本？报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。