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类器官冻存液

MCE 国际站：Organoid Cryopreservation Medium (Serum Free)

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-K6014

存储条件：4℃，3 年

产品活性：MCE 类器官冻存液是一种即用型类器官冻存液，可广泛应用于多种哺乳动物（如人、鼠、猪、牛等）来源的类器官和细胞系的冻存。

描述及优势：MCE 类器官冻存液是一种即用型类器官冻存液，可广泛应用于多种哺乳动物（如人、鼠、猪、牛等）来源的类器官和细胞系的冻存。 本产品不含血清，无任何动物源组分，可减少各类细菌、病毒和支原体等的污染，保证冻存类器官的安全。

操作流程：类器官/细胞冻存 建议选用生长状态良好的类器官/细胞进行冻存 1. 冻存盒准备：提前将冻存盒平衡至室温或 4℃。 2. 类器官/细胞回收：在类器官培养孔板中加入适量类器官基础培养基，使用细胞刮刀或 1 mL 移液枪枪头吹打从而将细胞培养孔内容物剥离出培养板并转移至离心管内。150 - 300 g 离心 3 min 弃上清收集类器官。 3. 类器官分装：在离心后的类器官/细胞中加入预冷的类器官冻存液，调整细胞浓度至 1 × 103 - 1 × 107 个细胞或对应细胞量的类器官/mL，充分混匀后转移至细胞冻存管中。 注：a. 建议 1 × 103 - 1 × 107 个细胞/mL 类器官冻存液。 b. 建议冻存管内细胞悬液体积大于 0.5 mL。 c. 对于冻存体积过大、具有多层上皮或由鳞状细胞构成的类器官，由于这类类器官结构较为紧密，建议使用类器官消化液（MCE 货号：HY-K6013）进行适当消化，随后用类器官基础培养基清洗两次，再进行分装冻存。 4. 类器官冻存：将冻存管转移至细胞冻存盒中，随后将冻存盒放入 -80℃ 冰箱中。12 - 24 h 后转移至液氮中长期保存。 类器官/细胞复苏 实验开始前先 37℃ 预热类器官/细胞基础培养基 1. 冻存管解冻：在 37℃ 的水浴中快速解冻冻存管，待冻存管内的冻存物仅剩少量冰渣时，立即停止水浴，并迅速转移至超净操作台。 2. 稀释：将冻存悬液转移至离心管中，缓慢加入 5-10 倍体积的预热完全培养基，轻柔混匀。 3. 离心：150 - 300 g，3 min 离心上述类器官/细胞悬液，弃上清并加入完全培养基重悬类器官/细胞沉淀。重复离心一次洗涤细胞。 4. 获得的类器官/细胞沉淀用完全培养基重悬后即用于后续类器官/细胞的培养。

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