间充质干细胞（MSC）成软骨诱导分化图 赛百慷

产品描述

由iCell团队精心优化的间质干细胞成软骨诱导分化培养基试剂盒，包括适合干细胞成软骨诱导分化的基础培养基和添加物。

本产品可增强间质干细胞向成软骨方向诱导分化的能力。

本产品仅用于科研用途，不可用于诊断、治疗、临床、家庭及其他用途。

使用说明

成软骨诱导分化完全培养基的配制

1. 用75%乙醇擦拭试剂盒中各瓶/管的开口外壁，室温放置数秒使酒精挥发。

a) 地塞米松

b) 抗坏血酸

c) ITS添加物

d) bing酮酸钠

e) 脯氨酸

f) 间质干细胞成软骨诱导分化基础培养基

2. 超净工作台中将以上(a) ~(e)全部加入间质干细胞成软骨诱导分化基础培养基 (f) 中， 制备成软骨诱导分化完全培养基的预混液。

3. 无菌吸取少量成软骨诱导分化基础培养基洗涤各瓶/管，尽可能将所有组分完整地加入基础培养基中，少量残留可能会影响产品性能。

4. 轻晃配制好的预混液，混合均匀之后即可使用。

TGF-β1的稀释

1. 将TGF-β1 小量分装至耐低温储样管中，保存在-20℃或更低的温度下并于6个月之内使用完毕。试剂过期请务必放弃使用。

注意：吸取TGF-β1之前需短暂离心（2400 g）试剂管，使试剂聚集于管底以便取用。

2. 按照比例（1 mL预混液中加入10 μL TGF-β1），吸取实验所需剂量的 TGF-β1，

加入相应体积的预混液中配制成软骨诱导分化完全培养基，轻轻地上下颠倒试剂管以确保试剂混合均匀。

重要提示：配制好的成软骨诱导分化完全培养基必须在 12 小时之内使用。

成软骨诱导分化操作规程

1. 进行成软骨诱导分化实验之前，需要对常规消化后的细胞进行计数。

2. 将3-4×10 5个细胞转移到15 mL离心管中，250 g离心4 min。

3. 吸去上清。加入0.5 mL预混液，重悬上一步离心所得沉淀，以清洗ICELL间质干细胞，室温下150 g离心5 min。

4. 重复步骤3，再次清洗细胞。

5. 将上一步所得沉淀用0.5 mL 间质干细胞成软骨诱导分化完全培养基重悬。

6. 室温下150 g离心5 min。

7. 拧松离心管盖以便于气体交换，将其放置于37℃，5% CO2的培养箱中培养。

注意：

1 此步骤不需要吸掉上清并重悬细胞。

2 24 小时之内不要摇动离心管。

8. 当细胞团出现聚拢现象时（一般为24 h或48 h后，实际视细胞生长情况而定）轻弹离心管底部使软骨球脱离管底悬浮在液体中。

9. 自接种开始计算，每隔2-3 d 给细胞换用新鲜的成软骨诱导分化完全培养基，每管约0.5 mL成软骨诱导分化完全培养基。

注意：小心操作，不要吸出软骨球。

10. 换液之后，轻弹离心管底部使软骨球脱离管底悬浮在液体中。稍加拧松离心管盖放入37℃，5% CO2的培养箱中继续诱导培养。

11. 一般持续诱导21-28天后，可对软骨球进行福尔马林固定和石蜡包埋切片，最后进行阿利辛蓝染色。

阿利辛蓝染色分析

1. 软骨球经石蜡包埋后切片。

2. 染色步骤：

a) 脱蜡和脱水；

b) 阿利辛蓝染液染色30 min；

c) 自来水冲洗2 min；

d) 蒸馏水冲洗1次。

3. 显微镜下观察阿利辛蓝染色效果，阿利辛蓝染色部分显示的是软骨组织中的内酸性粘多糖。

图 1 间质干细胞成软骨诱导分化阿利辛蓝染色效果

 产品稳定性及保存条件

1. 所有产品均需避光保存。

2. 保存条件及有效期

3. 所有产品请于保质期内使用，超过保质期，必须放弃使用。

4. 为确保产品质量，请避免反复冻融相关产品。

质量控制

间质干细胞成软骨诱导分化培养基已用间质干细胞进行性能测试。主要的鉴定标准包括：

· 无菌检测（细菌、真菌和支原体检测）

· pH测试

· 渗透压检测

· 内毒素检测

间充质干细胞（MSC）成软骨诱导分化图 赛百慷信息由赛百慷（上海）生物技术股份有限公司为您提供，如您想了解更多关于间充质干细胞（MSC）成软骨诱导分化图 赛百慷报价、项目、资质、周期、参考标准等信息，欢迎来电或留言咨询。