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简介 RNA 干扰 (RNA interference, RNAi)技术,是将与内源mRNA 编码区同源的小片段(19 -23bp)外源双链 RNA(siRNA)导入细胞中,引发细胞中相应mRNA 高效特异性降解,从而导致特定基因表达沉默(knock down)的一种实验技术。吉赛生物针对环状RNA的接头序列设计siRNA序列特异性敲低目的环状RNA的表达。对于每条选定的siRNA靶序列,设计 siRNA 正义链和反义链,以 loop(9nt or 10nt) 相连,形成稳定的发卡RNA,即为 shRNA(short hairpin RNA),可构建shRNA质粒直接转染或通过病毒包装后转染细胞,并对转染细胞进行阳性鉴定和转代细胞株的培养,zei终实现对特定环状RNA特异性敲低的作用。
我们的优势
1.shRNA载体转染效率高、操作简单、RNA沉默效果易于检测;
2.设计环状RNA divergent primers检测敲低环状RNA的效率;
3.特异性敲低环状RNA的表达,不影响亲本线性基因的表达;
案例
针对环状RNA circPAIP2进行siRNA敲低实验示意图
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