细胞转移

细胞转移

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服务说明

细胞运动性的研究，尤其是在肿瘤细胞的侵袭转移中应用很广泛。肿瘤转移是恶性肿瘤生物学特征之一，在肿瘤转移过程中的某些阶段，肿瘤细胞表现出较强的运动能力，如肿瘤细胞从原发瘤灶分离，进而侵入到邻近组织及再穿过血管壁进入血液循环和穿出血管壁进入继发部位等，因而细胞运动性的研究在弄清肿瘤细胞侵袭和转移的机制上有重要位置。

肿瘤运动性的研究方法主要是体外检测肿瘤细胞主动移行的能力，一般有划痕实验、诱导转移（transwell）实验等。

细胞划痕

是测定了肿瘤细胞的运动特性的方法之一，借鉴体外细胞致伤愈合实验模型，在体外培养的单层细胞上，划痕致伤，然后通过药物或者干扰手段观察肿瘤细胞迁移的能力。 

吉凯实验实例：

针对目的基因的shRNA靶点病毒或对照病毒感染HepG2细胞，四天后，在96孔板中铺细胞50000细胞，次日待细胞贴壁后用枪头均匀划伤，用PBS洗尽划痕时残余细胞，以无血清培养基培养，检测细胞不同时间的划痕愈合情况，从而筛选出运动细胞发生变化的实验组。

对照组：感染阴性对照慢病毒细胞；
处理组：感染针对目的基因的shRNA慢病毒细胞

结论：降低目的基因的表达后，细胞运动能力减弱。

诱导转移

将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。常用普通transwell小室（迁移实验）和铺有基质的transwell小室（侵袭实验）两种方式。

迁移实验通常选择带有8.0µm微孔的聚碳酸酯膜小室，上室铺细胞，下室加入FBS或某些特定的趋化因子，细胞会向营养成分高的下室跑，定量进入下室的细胞可反映细胞的迁移能力。侵袭实验与迁移实验不同的是，在聚碳酸酯膜上室侧铺上一层基质胶，用以模仿体内细胞外基质，细胞欲进入下室，先要分泌基质金属蛋白酶（MMPs）将基质胶降解，方可通过，定量进入下室的细胞可反映肿瘤细胞的侵袭能力。

吉凯应用实例：
1. 迁移实验

不同的方式处理乳腺癌细胞MCF7后，细胞的运动能力发生改变。 

2. 侵袭实验 

对照组：感染阴性对照慢病毒细胞；处理组：感染目的基因shRNA靶点慢病毒细胞

结论：RNA干扰后细胞运动能力减弱。

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