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实验原理
质粒载体可以有效地运载外源基因片段进入受体细胞,可以独立自主大量复制并且很容易从宿主细胞中分离纯化,因而在分子生物学使用十分广泛。常用的载体可分为克隆载体和表达载体,根据载体进入受体细胞的不同,分为原核细胞表达载体、真核细胞表达载体以及穿梭载体。
实验流程 客户提供靶基因和目标载体,通过扩增、酶切、连接构建载体,再转化。在经过筛选阳性克隆,测序验证。验证后,扩大菌群,抽提质粒。按照客户需求提供质粒或菌液。结果展示 图1 目的基因的载体构建电泳图A:目的片段的菌落PCR鉴定结果(泳道1-5:1-5号克隆的菌落PCR鉴定结果,其中1-3号样本为菌落PCR阳性样本,4-5号样本为菌落PCR阴性样本;泳道6:阳性对照;泳道7:阴性对照)。B:目的片段的酶切电泳结果(目的片段的酶切电泳结果,载体片段5300bp,目的片段820bp)。
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