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ELISPOT检测
技术服务介绍
ELISPOT 全名为Enzyme-linked Immunospot Assay,其技术原理与ELISA相似。其实验设计是在96微孔培养盘底部披覆PVDF薄膜,用来吸附特殊挑选、且无毒性(不含sodium azide、内毒素endotoxin)的单株抗体。静脉血PBMC细胞经适当分离处理后,会被分配到微孔盘上,再接受适当的抗原刺激,并将微孔盘放置于温箱中过夜培养一段时间。一般而言,记忆型T细胞在受抗原刺激数小时后会开始分泌细胞激素,此时局部(在紧靠分泌细胞的周围)分泌出的细胞激素会被PVDF薄膜上特异抗体捕获。微孔盘中的细胞被移除并清洗后,被捕获的细胞激素可进一步使用生物素(Biotin)标记的二次抗体来标志,其后再以结合酵素的StreptAvidin与之作用,并加入酵素受质使其呈色,有反应作用的细胞会留下约10-20mm大小染色的斑点。
技术服务内容
服务内容
结果内容
备注
实验步骤,斑点图,结果分析
客户需提供ELISPOT检测试剂盒
客户须知
1.样本要求:液态类标本(细胞培养上清、组织匀浆、血清、血浆、尿液、胸水、腹水、脑积液等)保存
2.样本量:每个样本收集体积=150µL*检测指标数。
3.样本保存:请尽早保存,2-8℃保存一天。如需更长时间必须冷冻(-20℃或-70℃)保存
实验周期
20个工作日内(具体实验周期视实验方案而异)
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