Herman 等( 1996 )在使用重亚硫酸盐处理的基础上新建的一种方法。该方法敏感性高,主要用于作定性研究。用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物,如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能得到扩增片段,则说明该位点存在甲基化;反之,说明被检测的位点不存在甲基化。 特点:适用范围广,能够检测特异位点是否发生甲基化。
服务订购
项目类型检测方法DNA甲基化分析服务价格
DNA甲基化服务
BSP-10个克隆
DNA提取和亚硫酸氢盐处理
片段扩增+10克隆测序
140元/样品
800元/样本/片段
MSP-电泳法
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流程 1、样品用Qiagen试剂盒进行基因组 DNA 提取与重亚硫酸盐处理(包括纯化和脱磺基反应)。 2、用甲基化引物设计相关软件在甲基化区域设计 甲基化特异性的引物( primer Ⅰ )或非甲基化的引物( primer Ⅱ ) 引物 2 对。 3、 进行特异性的 PCR 扩增,只有结合完全的甲基化或非甲基化特异性引物的片段才能扩增出产物。 4、检测 MSP 扩增产物,如果用针对处理后甲基化 DNA 链的引物能扩增出片段,则说明该被检测的位点存在甲基化;若用针对处理后的非甲基化 DNA 链的引物扩增出片段,则说明被检测的位点不存在甲基化。