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免疫共沉淀(coimmunoprecipitation)是一种在体外探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法。其原理是如果两个蛋白在体外体系能够发生特异性相互作用的话,那么当用一种蛋白的抗体进行免疫沉淀时,另一个蛋白也会被同时沉淀下来。与酵母双杂交技术不同,免疫共沉淀技术所利用的是抗原和抗体间的免疫反应,是一种基于体外非细胞的环境中研究蛋白质与蛋白质的相互作用的方法。 相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态;蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响;可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。
免疫共沉淀(Co-IP)应用范围
1. 测定两种目标蛋白质是否在体内结合;
2. 确定一种特定蛋白质的新的作用搭档;
3. 分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。
实验步骤
1. 在细胞裂解液中孵育抗体
2. 将样品加入蛋白A/G琼脂糖树脂
3. 通过离心去除未结合蛋白
4. 洗脱结合蛋
免疫共沉淀(Co-IP)服务内容
1. 样本总蛋白提取及与特定抗体反应;
2. 用Protein A/G捕获特定的抗体—蛋白复合物;
3. 洗涤去掉未被捕获的蛋白,得到纯蛋白抗体符合物;
4. 通过SDS-PAGE或Western Blot检测IP结果;
5. 向客户提交实验结果图、分析结果及实验报告。
咨询热线******曾经理
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