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实验小鼠遗传质量快速检测服务实验动物的遗传质量对动物实验结果有重要影响。近交系小鼠是医学生物学研究中广泛应用的实验动物,其本身的质量尤其是个体基因的纯合性与不同个体遗传一致性对实验结果的可比性、可重复性和准确性起着决定性作用。随着生物医学的发展,无论是学术界还是生物技术产业界,对实验动物质量的要求越来越高。1. 技术原理与实验流程1.1遗传位标的选择在小鼠基因组上挑选45个SNP位点,针对各SNP位点侧翼进行引物和探针设计。1.2技术原理--高通量PCR-LDR分型 高温连接酶检测反应技术是一种成熟的SNP分型检测方法。其原理是高温连接酶检测到模板DNA与两条探针DNA的接头处存在着碱基错配,则连接反应不能进行。针对这45 SNP位点,将其分成4组,每组进行多重PCR-LDR分型。2实验结果及分析2.1测序仪检测结果 PCR-LDR 产物测序仪检测结果如图4,从图中可见,分型信号清晰唯一,无杂信号的干扰。此外,对部分位点经sanger测序验证,分型准确度为100%。3 服务流程3.1 标准服务流程1)客户沟通,确认检测小鼠品系以及样本数,提示实验可行性。2) 建立实验方案,并在此过程中和客户保持密切沟通。3) 大规模实验,有严格的指控流程保证实验结果可靠3.2 实验数据质量控制流程1) 所有分型信号要求信号清晰唯一,排除不确定信号干扰。2) 每板数据中都有阴性对照,质控PCR和LDR污染数据。3) 整个实验服务流程有15%的双盲重复对照,保证数据准确可靠。
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