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HBMEC分离自人大脑组织,原代冻存,冰冻运输。每管细胞密度超过5×105/ml。细胞特性经vWF/Factor VIII和CD31 (P-CAM) 免疫荧光鉴定,能够摄取DiI标记乙酰化低密度脂蛋白(DiI-Ac-LDL)。本细胞经检测不含HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母菌和真菌。
分离纯化方法:采用胰酶、胶原酶联合消化法分离人脑恶性胶质瘤微血管片段,利用结合CD105抗体的MACS MicroBeads免疫磁珠内皮细胞分选系统纯化GDMEC;应用倒置显微镜、透射电镜观察细胞形态特征,和免疫细胞化学技术显示血管内皮细胞特异性表面标志,流式细胞术、MTr法研究增殖和凋亡,鉴定所获得的GDMEC。结果所获GDMEC具备多种典型的微血管内皮细胞特征:细胞呈多边形或梭型、呈铺路石样生长;电镜下见weibel-Palade小体;FⅧ-RAg阳性;
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