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免疫印迹(western blotting)是在蛋白质电泳分离和抗原抗体检测的基础上发展起来的一项检测蛋白质的技术。其基本原理是在电场的作用下将SDS-PAGE电泳分离的蛋白质转移至一种固相支持物,然后用特异性抗体来检测目的蛋白在样本中的表达情况。其检测蛋白质的灵敏度为ng级,并可以对目标蛋白进行定性和半定量的分析。主要实验步骤如下:1、 样本准备:样本背景分析,蛋白质的抽提和定量。2、 SDS-PAGE电泳。3、 蛋白质转移至一种固相支持物(NC膜或PVDF膜)。4、 封闭,一抗,二抗孵育。5、 化学发光法显色蛋白,分析结果。6、 提供详细的实验报告。客户需要提供的物品:1、 待检样本及相关背景说明。2、 特异性一抗及对应的二抗。
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