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一、RNA干扰技术概述 RNA干扰(RNA interfering,RNAi)现象是由与靶基因序列同源的双链RNA引发的广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程。由于RNAi具有高度的序列专一性,可以特异地将特定的基因沉默,从而获得基因基因功能丧失或基因表达量的降低。因此可以作为功能基因组学研究的一种强有力的工具。RNAi技术可以广泛应用到包括功能学,药物靶点筛选,细胞新号传导通路分析,疾病治疗等。 成功的RNAi实验设计是您实验成功的前提。达晖生物专业的设计人员凭借多年的设计经验为您提供完整的RNAi实验设计服务和优化的siRNA,shRNA以及RNAi检测的探针和引物的设计服务。完善的实验设计,精准的靶标以及引物设计使您的实验节省人力和物力。二、技术流程 1、基因的mRNA序列设计3条干扰片段(客户不提供干扰序列,可由达晖设计);2、把干扰片段设计成茎环结构克隆到含U6启动子或其他特定启动子的载体中,测序验证无误;3、把空载和干扰质粒共转染细胞;4、用western blot检测干扰效率,筛选到干扰效率最高的片段可用于后续的研究。三、客户需提供 1、客户提供干扰序列:需要提供RNA干扰的目的基因的名称(或Gene Bank号)、序列,并与我们共同讨论实验方案;2、客户不提供干扰序列:由达晖代为设计三条siRNA干扰序列。 四、报告内容及标准 1、siRNA/shRNA序列;2、构建的载体以及测序报告;3、荧光定量PCR检测报告/Western blot检测报告等;4、具体实验方法、步骤、所用试剂、仪器及相关分析数据等。
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