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双十一节后豪礼大放送!
活动时间:2018年11月17日-2018年11月30日
活动内容:BSP检测DNA甲基化,原价1200,现价只需600!!
活动说明:双十一活动结束了,是不是觉得不够满足呢?为满足广大科研工作者的服务需求,英拜特设双十一节后促销啦!折扣力度不变,服务数量有限,大家先到先得哦!本活动最终解释权归上海英拜生物科技有限公司所有。
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BSP:
原理:结合Bisulfite的测序法是一种灵敏的能直接检测分析基因组DNA甲基化模式的方法。Bisulfite处理后,用针对改变后的DNA序列设计特异性引物并进行聚合酶链式反应(PCR)。 PCR产物中原先非甲基化的胞嘧啶位点被胸腺嘧啶所替代,而甲基化的胞嘧啶位点保持不变。PCR产物克隆后进行测序。通过这个方法能得到特定位点在各个基因组DNA分子中的甲基化状态。特点:1. 特异性高,它能够提供特异性很高的分析结果,这是所有其他研究甲基化的分析方法所不能比拟的;2. 灵敏度高,可以用于分析少于100个细胞的检测样品。用微量的基因组DNA进行分析就能得到各个DNA分子精确的甲基化位点分布图。流程图:
流程:DNA用Bisulfite处理后进行PCR扩增,扩增片段纯化后连接进载体,转化大肠杆菌,过夜培养后挑单个阳性克隆进行测序。得到每个DNA分子特定区域甲基化位点的分布图。 实验步骤:A.DNA制备用DNA抽提试剂盒(Promega, cat. no. A1125)抽提组织,细胞培养物,石蜡包埋组织切片样品中的基因组DNA。B.Bisulfite处理C.DNA纯化用Wizard DNA clean-up kit (Promega, cat. no. A7280)纯化Bisulfite处理后的DNA样品。D.DNA脱磺基反应E.PCR扩增F.PCR产物琼脂糖电泳后回收纯化,随后连接到pGEM-T EASY 载体中克隆及测序。
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