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Taqman探针分析法检测SNP原理:针对染色体上的不同SNP位点分别设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增。探针的5’端和3’端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当溶液中存在PCR产物时,该探针与模板退火,即产生了适合于核酸外切酶活性的底物,从而将探针5’端连接的荧光分子从探针上切割下来,破坏两荧光分子间的PRET,发出荧光。通常用于少量SNP位点分析。 适宜范围:Taqman探针分析法检测SNP适用于低通量的SNP检测。实验流程:1、目标基因引物、探针设计合成2、样品基因组抽提3、引物探针有效性检测4、样品检测相关要求(客户提供):客户请提供准确的基因名称和序列以及详细的SNP位点信息。样品要求:1、血液样品(至少4ml、需加EDTA),针对血液样品,根据实际情况酌情加收DNA提取费用;2、如客户提供基因组DNA样品,需-20度条件下保存和运输。纯度要求:OD260/280在1.6-1.8之间;OD260/230在1.8-2.2之间。浓度要求:基因组DNA浓度>100ng/ul。最终结果:具体试验流程(包括:实验步骤;主要仪器及试剂说明(含仪器厂家、型号;试剂厂家、批号)),电泳图,定量PCR结果,统计分析结果等。
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