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双向电泳技术 2-D GE
背景知识: 蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心。双向电泳由O. Farrell’s于1975年首次建立并成功地分离约1000个E.coli蛋白,并表明蛋白质谱不是稳定的,而是随环境而变化。双向电泳原理简明,第一向进行等电聚焦,蛋白质沿pH梯度分离,至各自的等电点;随后,再沿垂直的方向进行分子量的分离。目前,随着技术的飞速发展,已能分离出10000个斑点(spot)。当双向电泳斑点的全面分析成为现实的时候,蛋白质组的分析变得可行。技术原理:1、根据蛋白质的等电点(第一向)和分子量(第二向)的不同进行分离。2、电泳后根据蛋白质的上样量对胶进行考马斯亮兰染色、银染或荧光染色,然后用相关软件对电泳图象进行分析。
双向电泳流程图
主要应用: 凝胶中蛋白的检测 图像采集和分析 蛋白鉴定 分离蛋白质组所有蛋白您只需提供:新鲜且足量的样品(组织不少于500 mg,细胞不少于107),或提取的总蛋白(≥ 200 μl)。我们提供:原始SDS-PAGE胶,电子图片,分析差异点,实验报告单等。
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