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原理:免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。结合化学发光检测,可以同时比较多个样品同种蛋白的表达量差异。
实验流程:1、细胞及组织蛋白质抽提;2、蛋白质定量;3、变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE);4、蛋白质转膜;5、膜的封闭;6、一抗、二抗孵育;7、结果检测:化学发光法检测,X 胶片曝光显影;8、数据分析。
服务要求:1、客户需自备一抗,或由本公司代购;2、标本尽可能新鲜;标本量:组织块大于100mg;细胞数大于5×106;3、技术部将在收到标本后15-20个工作日之内提交实验结果,实验结果以数据和图片的形式提交给客户。
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