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稳转细胞株构建服务 在宿主细胞中过表达或者沉默该基因,使该基因在宿主细胞中可长时间的稳定表达,然后对目的基因进行一些列的功能研究。稳转细胞株构建服务内容低毒、高转染效率脂质体转染适用于贴壁细胞和悬浮细胞的转染;通过脂质体介导转染,将目的基因导入细胞48小时后,目的基因即在细胞内表达。此时为了建立稳定细胞系,可根据不同基因载体中所含的抗性标记,选用相应的药物对靶细胞进行筛选,从而得到稳定表达外源基因的细胞克隆。 稳转细胞株构建实验步骤1.筛选浓度测定:前一天细胞全部死亡的抗生素浓度作为筛选浓度2.细胞接种:转染实验前一天接种细胞(铺板密度依细胞种类而不同),使得转染当天细胞达到80%汇合3.细胞转染4.抗生素筛选5.鉴定筛选结果结果展示:服务说明1.含有目的基因的可直接用于转染的质粒(提供测序图谱)2.待转染的细胞系(≥3×106个细胞,可传代,倍增时间小于48小时)3.关于细胞培养条件的说明:本公司提供DMEM培养基,RPIM1640培养基以及G418抗生素,如需其它培养基及筛选条件,也请客户一并提供。特殊基因请客户提供相应抗体以供检测实验完成周期及交付标准:1.实验周期: 根据样本2.交付标准:1.构建好的稳定细胞系、实验报告染适用于贴壁细胞和悬浮细胞的转染;通过脂质体介导转染,将目的基因导入细胞48小时后,目的基因即在细胞内表达。此时为了建立稳定细胞系,可根据不同基因载体中所含的抗性标记,选用相应的药物对靶细胞进行筛选,从而得到稳定表达外源基因的细胞克隆。 服务流程1)筛选浓度测定:前一天细胞全部死亡的抗生素浓度作为筛选浓度2)细胞接种:转染实验前一天接种细胞(铺板密度依细胞种类而不同),使得转染当天细胞达到80%汇合3)细胞转染4)抗生素筛选5)鉴定筛选结果 服务说明●含有目的基因的可直接用于转染的质粒(提供测序图谱)●待转染的细胞系(≥3×106个细胞,可传代,倍增时间小于48小时)●关于细胞培养条件的说明:本公司提供DMEM培养基,RPIM1640培养基以及G418抗生素,如需其它培养基及筛选条件,也请客户一并提供。特殊基因请客户提供相应抗体以供检测 我们提供构建好的稳定细胞系、实验报告 质量保证转染细胞的外源基因稳定表达
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