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Leica TCS STED 共聚焦系统光学显微成像系统的分辨率受光学衍射的限制这种现象是Emst Abbe于1873年发现的,即当物体之间的距离小于光波长的三分之一时将无法分辨,因为这已经达到了衍射理论的最小聚焦光斑尺寸。减小波长和增大孔径角都能减小聚焦光斑尺寸。但是当波长<350nm时,无法在活细胞内成像而且在技术上,透镜的半孔径角只能达到70*,有限的孔径角导致分辨率降低。
直到20世纪90年代中期,人们发现当粒子在两个分子态之间达到饱和的跃迁时,如果在空间上加以调制,则可使聚焦光强度分布在空间上存在中心零点。利用这种分子态的饱和损耗,可以实现空间各个方向上的纳米级分辨率,该方法被称为受激发射损耗(STED)荧光显微术。
主要功能:
基于TCS SP5共聚焦显微镜平台,SP5可升级至STED;突破Abbe光学衍射极限,将侧向分辨率由200nm提高到90nm,为细胞内生命过程的理解和研究开辟了一条新途径:
STED的激发采用635nm的二极管激光:损耗采用多光子激光;共聚焦采图与STED采图之间的转换仅需一个按键;可配5个光诺式检测通道,包括4个共聚焦通道,1个STED通道;也可选择高灵敏度的雪崩式二极管(AvalanchPhotodiode,APD)或透射和反射NDD检测器;可配LAS AF各软件模块。
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