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染色质免疫共沉淀
真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在,研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径。与传统的EMSA技术相比,染色质免疫沉淀技术(CHIP)能真实完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白,是目前研究体内DNA与蛋白质相互作用的佳方法。
原理
是在活细胞状态下以甲醛固定蛋白质-DNA复合物,超声将其随机切断为长度范围内的染色质小片段,然后加入目的蛋白抗体,通过抗体沉淀靶蛋白-DNA复合物,通过洗脱的方法得到富集的靶蛋白-DNA复合物,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测(PCR分析),从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。
应用
1.组蛋白修饰研究
2.转录调控分析
3.免疫开发研究
4.有丝分裂研究
5.DNA损伤与凋亡分析
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