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PriboFast® 290赭曲毒素固相净化柱
玉米,小麦,大麦和稻谷中的应用
赭曲霉毒素A(OTA)由曲霉菌属(Aspergillus) 或青霉菌属(Penicillium) 的几种真菌产生。根据这些真菌的特性,其产毒多发生在中温带和亚热带地区,在大多数农作物中都能发现,如谷物,咖啡和葡萄。赭曲霉毒素A被证明对大多数动物是潜在的肾毒素,研究表明OTA具有致癌性和致畸性。
样品准备:
取代表性的二次取样样品,用碾磨机粉碎,要使70%以上的样品颗粒在1mm以下。称取25g粉碎后的二次取样样品,加12.5ml 0.1M H3PO4 到样品中, 加125ml 二氯甲烷,混
匀。盖紧后振荡30分钟或高速搅拌2分钟。用定量滤纸过滤到样品杯,盖上盖。
净化:
取5ml样品提取液放入净化柱中,重力过柱。溶液弃掉。溶液液相到达填料上层后,分别用5ml正己烷,再用15ml二氯甲烷(3*5ml)清洗柱子,弃去溶液。清洗完毕,净化柱下连接干净的离心管,进行洗提。用20ml 99/1 二氯甲烷/甲酸(2*10ml)洗提。将洗提液在60℃蒸干。
注意:样品提取液过柱的速度大约为2ml/分钟。
分析方法:
Aglient 1100 系列HPLC
Agilent C18 5μm 4.6×150mm
50+50+1 水+乙腈+乙酸溶液 等强度,0.6ml/min
加样体积:50μl
荧光检测器:
激发波长:330nm 发射波长:460nm
性能指标:
对玉米,小麦,大麦和稻谷的回收率为:>80%
定量检测限:0.3μg/kg
研磨,称取25g样品
加12.5ml 0.1M H3PO4,125ml 二氯甲烷,
混匀
过滤上清液,加5ml样品重力过柱;
用5ml正己烷,15ml二氯甲烷清洗柱子
用20ml 99/1 二氯甲烷/甲酸(2*10ml)洗提
60℃吹干
用流动相500μl溶解
注射入仪器
化学试剂
●H3PO4
●二氯甲烷
●蒸馏水
●冰乙酸
●乙腈HPLC级
试剂和缓冲液的准备
●流动相:将50ml乙腈,50ml蒸馏水或去离子水,1ml乙酸混合,调整至室温。
PriboFast 290 赭曲霉毒素固相净化柱, PriboFast 290
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