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吉锐生物的蛋白表达专家在 CHO-K1 基础上开发出短周期高表达株系 CHO-SC 为表达载体的真核表达系统,利用吉锐生物专利的MCI 技术,将目的基因的多个拷贝定点整合到基因组高表达位点,同时实现稳定遗传。高效的转染和整合技术,加上特有的短周期高表达株系,可以低成本,短周期为您提供毫克级的高质量蛋白,解决传统的表达系统所面临的多种缺陷,帮助您快速获得满意的实验结果。
❀实验流程
1. 亚克隆:将客户优化好的目的基因 (吉锐生物也可以提供基因优化服务)克隆到吉锐生物的定点整合载体上; 2. 转染:采用独家的 CHO-MCI(多拷贝整合)技术,将定点整合载体电转到 CHO-SC 细胞中; 3. 稳转池验证:30ml 摇瓶小试表达目的蛋白和纯化。将细胞表达上清通过合适的,可与重组表达目的蛋白的标签结合的柱填料进行纯化,跑 SDS-PAGE,通过已知确切浓度蛋白作为control带进行半定量和纯度分析,并用Bradford法对蛋白进行定量 4. 扩大培养:根据 30 ml 的小试定量结果,估算获得客户要求数量的蛋白所需要扩大培养的体积,拿到足够量的蛋白。
❀实验案例
❀常见问答
Q-1:此蛋白表达技术有什么优势? A-1:解决 E.coli 表达真核蛋白时,易形成包涵体的问题;与其他表达系统比较,表达的真核蛋白结构更接近天然结构,活性更高;表达产物有正确的修饰,比如糖基化,甲基化等;解决真核生物表达,成本高昂的问题;生产周期 短,可以快速达到 ug, mg 级别,用于抗原抗体的制备。
Q-2:能简单介绍下技术原理吗? A-2:采用独家的 CHO-MCI(多拷贝整合)技术,构建定点整合载体并将其电转到 CHO-SC 细胞中,使目的蛋白基因定点整合到 CHO-SC 高表达位点上,实现目的基因的高表达。
全蛋白抗原制备,
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