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DNA甲基化在人的正常发育、X染色体失活、衰老以及许多人类疾病(如发育畸形、癌症、心血管疾病、糖尿病和神经心理失调等)过程中发挥重要作用,已经成为表观遗传学和表观基因组学的重要研究内容。奇悟生物采用MSP(甲基化特异性PCR法)技术、BSP(亚硫酸氢钠处理后测序法)以及HRM(高分辨率熔解法)技术,快速,准确进行甲基化检测。
MSP首先用亚硫酸氢钠修饰处理基因组DNA,然后针对甲基化和非甲基化引物进行PCR扩增,确定与引物互补的DNA序列的甲基化状态。灵敏度较高,应用范围广。
BSP方法为甲基化检测的金标准,可定量检测基因甲基化水平。基因组DNA经亚硫酸氢盐处理后,设计BSP引物扩增目的片段,zei后对PCR产物进行克隆并选取8-10个转化子序列,即可确定所研究的CpG区域的甲基化频率。
高分辨率熔解法是检测CpG微点甲基化的一种全新技术,主要是根据DNA序列的长度、CG含量、碱基互补性差异以及特定饱和染料可以插入DNA双链中的特性进行检测。应用高分辨率的熔解曲线对样品进行分析,其分辨精度可以达到对单个碱基差异的区分。
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