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1、目的基因的质粒及亚克隆质粒2、PCR鉴定阳性克隆报告3、高拷贝筛选报告(至少筛选3轮)4、诱导表达实验报告5、Western Blot或PAGE验证报告 6、1L表达体系纯化后蛋白
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毕赤酵母蛋白表达服务酵母表达系统是工业微生物中应用较广泛的系统,兼有了原核表达的周期短、成本低廉、易操作等优点,易于工业级别放大培养;同时具备了真核细胞对蛋白的空间折叠,糖基化修饰等能力,使得蛋白可溶性大幅度提高,为蛋白的生理活性研究提供了强有力的工具。我们拥有丰富的酵母表达和纯化系统,致力于表达条件的优化和新方法的摸索,可以为广大科研用户提供完善的服务。
服务内容1、依据客户要求,设计克隆方案,将客户要表达的蛋白基因克隆到酵母表达载体,客户可以选择分泌表达(如pPICZaA 、pGAPZaA等)或胞内表达(如pPICZA 、pPIC3.5K等)。 2、将构建好的质粒转化到酵母宿主菌,如毕赤酵母或啤酒酵母。 3、PCR鉴定转化子,选择阳性转化子进行蛋白表达鉴定。 4、可以依据客户的要求,增加多拷贝转化子的筛选以及蛋白表达优化两项服务内容。 5、根据客户要求纯化重组蛋白。 客户需提供必要的资料1.待表达蛋白的基因序列。蛋白的基本特性(蛋白来源为分泌蛋白还是胞内蛋白,天然蛋白是否糖基化,蛋白是否稳定,蛋白的pI值等)。 2.所需纯化蛋白的量及用途,要求的纯度以及蛋白标签tag。 3.发货的具体要求:如缓冲液要求,是否冻干等。
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