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GeneCopoeia提供慢病毒载体的ORF、启动子、shRNA、miRNA前体克隆和 miRNA抑制剂克隆、CRISPR/Cas9核酸酶克隆。有丰富的融合标签供选择,例如IRES-eGFP、 Avitag®和HaloTag®等。生产过程有严格的质量控制,所有克隆经过全长测序,可用于即时表达。还提供优化的慢病毒包装质粒、细胞系、慢病毒浓缩试剂盒、 慢病毒颗粒以及慢病毒包装服务。
慢病毒载体ORF、启动子、shRNA和miRNA前体、CRISPR/Cas9克隆的优势
慢病毒载体|编码基因克隆 ORF 慢病毒表达克隆所采用的载体是自身复制灭活的,由于细胞不带有病毒外壳基因,转染后的细胞并不能产生病毒粒子。此外整合进基因组后导致5’ LTR启动子失活,阻止了慢病毒的复制。载体带有可进行高效率的包装、转染并稳定整合进靶细胞的基因组中的序列元件,从而使得我们的表达克隆在目的细胞高 效表达。 慢病毒载体|CRISPR/Cas9克隆 Cas9核酸酶慢病毒表达克隆,既能直接转染细胞也能用来包装病毒颗粒转导难转染的细胞。在宿主细胞中表达Cas9核酸酶。Cas9核酸酶能在sgRNA引导下剪切靶标DNA,形成双链断裂(DSBs)。 慢病毒载体|shRNA克隆 表 达质粒DNA或包含shRNA的病毒颗粒被导入靶细胞。使用哺乳动物启动子驱动目的序列的转录,序列经设计包括茎(19-29对核苷酸)和环,随后由 RNAi机制中的酶加工成为成熟的siRNA,siRNA和RISC复合体对目的基因所转录的mRNA产生特异的切割降解作用,从而导致了基因表达抑制。 45,000条人类、小鼠基因;针对每个靶标基因提供4个shRNA克隆,保证至少一个克隆抑制效率达70%! 慢病毒载体|miRNA抑制剂克隆 慢 病毒载体的miRNA抑制剂表达克隆 ,采用H1或者U6启动子驱动miRNA抑制剂的转录,以保证能在大多数哺乳动物细胞中高水平表达。载体表达的miRNA 抑制剂特异、稳定地结合细胞内成熟的靶miRNA,阻止miRNA介导的靶标mRNA的降解或者翻译抑制。miRNA抑制剂克隆可转(感染)染细胞进行瞬 时抑制或者稳定抑制。 我们的miRNA种类涵盖zei新miRBase数据库,拥有优越且持久的一致效率,极低的细胞毒性! 慢病毒载体|miRNA前体表达克隆 慢 病毒载体的miRNA前体表达克隆 是采用基于猫免疫缺陷病而构建的。RNA聚合酶III型的H1启动子驱动转录前体miRNA的茎环前体(大约有150核苷酸长度)。 随后通过RNAi的酶系加工生成成熟的miRNA。使得在同一载体的CMV启动子的驱动下共表达报告基因eGFP,双顺反子下游的新霉素筛选基因也同时表 达。可作为监测miRNA表达,转染和转化的效率的参考标准。 我们的miRNA种类涵盖zei新miRBase数据库,其表达克隆经表达框全长测序,载体经优化后确保成熟miRNA的高表达。 慢病毒载体|启动子克隆 GeneCopoeia 提供已构建好的GLuc-ON启动子克隆。我们既提供单报告基因载体系统,也提供双报告基因载体系统。 单报告基因载体系统以Gluc或GFP作为启动子报告基因;双报告基因载体系统以Gluc作为启动子报告基因,以分泌型碱性***酸酶(SEAP)作为信号标准化的内参。 GLuc-ON™ 启动子克隆采用分泌型的Gaussia荧光素酶(GLuc)作为报告子,可在活细胞中对超过20,000种人类和18,000种小鼠启动子进行实时活性分析。
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