毛细管凝胶电泳法（CGE-LIF）分析宿主细胞残留DNA的片段分布

生物制品中的疫苗、重组蛋白药、抗体药等产品多采用连续传代的动物细胞株表达生产。虽然经过严格的纯化工艺，但产品中仍有可能残余宿主细胞的DNA片段。这些宿主细胞残留DNA（HCD）可能带来传染性或致瘤性风险。

现有研究表明，一个功能基因至少在200 bp以上，因此残留DNA片段越大，风险等级越高。美国食品药品监督管理局（FDA）关于人类基因治疗新产品生产指导文件中明确指出HCD的片段要小于200 bp；国家药品监督总局（NMPA）生物制品药学部同样在基因治疗产品药学研究与评价技术指导原则的征求意见稿中指出，HCD的片段要小于200 bp。因此基因治疗终产品中需要合适的方法检测HCD的片段大小分布情况。

图1 PA800 Plus药物分析系统与dsDNA 1000 试剂盒

使用SCIEX PA800 Plus药物分析系统，结合激光诱导荧光检测器（LIF）和dsDNA 1000 试剂盒（货号477410）（图1），可对HCD进行片段分布检测。

该毛细管凝胶电泳（CGE-LIF）方法具有如下特点：

• 分布范围：可检测50 bp-1000 bp的片段大小，且可进行条件优化检测长至15 kb的片段大小。

• 灵敏度：可检测10 pg/mL的片段浓度，若在前处理的过程中对DNA进行浓缩处理，可获得更高的检测灵敏度， 满足各种残留DNA检测的要求。

• 操作方便：具有商品化的样品前处理试剂盒和分离试剂盒。

• 符合法规：仪器具有操作（OQ）认证，操作软件能够进行权限设置和审计追踪。

图2 CGE-LIF方法分析DNA片段标准品的大小

参考文献：

Xuan Shen, Xiaomu Chen. Size analysis of residual host cell DNA in cell culture-produced vaccines by capillary gel electrophoresis. Biologicals 41 (2013) 201-208