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WB(Western blot)与凝胶成像系统怎么选?赛默飞 iBright——最先进的多功能成像系统


WB(Western blot)与凝胶成像系统怎么选?赛默飞 iBright——最先进的多功能成像系统 

 

在分子生物学和医学研究中,Western blot(蛋白质印迹)和凝胶成像是最常见的分析手段。随着科研需求的增加,研究人员越来越倾向选择操作简便、结果可靠且符合合规要求的成像系统。作为全球领先的科学服务品牌,本文聚焦于 Invitrogen iBright 成像系统,解释它为何能成为实验室从“能用”到“好用”的升级之选。 

 

一台设备覆盖核心与进阶应用:从“凝胶成像系统”到“多功能成像系统” 

 

iBright 提供多达 五种成像模式,涵盖蛋白凝胶、核酸凝胶、化学发光 Western blot、荧光 Western blot,以及可混合信号的 Universal 模式;每次采集会自动记录可见图像,便于分子量等后续分析。这意味着它既是凝胶成像系统,也是化学发光成像仪/WB 化学发光成像仪与荧光平台的多功能成像系统,显著提升设备利用率。 

图像模式 

可捕获哪种信号? 

蛋白预制胶 

凝胶(例如,考马斯亮蓝染色、银染)和膜(例如,丽春红、Thermo Scientific Pierce Reversible Protein Stain)的比色染色,凝胶的荧光染色(例如,Invitrogen SYPRO Ruby 染色) 

核酸凝胶 

溴化乙锭和 Invitrogen SYBR 染色 

化学发光 Western Blot 

使用各种常用 HRP 和 AP 底物(如 Thermo Scientific SuperSignal 和 Invitrogen WesternBreeze 底物)的化学发光印迹  

荧光印迹 

使用常用 RGB(可见光范围)和近红外荧光基团(如 Invitrogen Alexa Fluor 和 Alexa Fluor Plus 偶联物)进行荧光染色 

通用 

自定义模式,用于对包含多种信号的样品进行成像,例如化学发光、荧光、比色染色和/或可见图像;图像显示类似于荧光印迹模式,允许为任意样品添加伪彩色 

 

强大的摄影成像功能保证 “可发表级”图像 

 

· 9.1 MP 冷却 CCD 相机,在默认与可调 binning 设置下兼顾分辨率、灵敏度与成像速度,适合不同场景的数据采集。 

 

· Smart Exposure™ 自动曝光能快速给出各通道最优曝光,降低过曝/欠曝风险;荧光多通道会分别优化曝光时间,减少通道间的妥协。 

 

· Smart Range™ HDR 将一长一短两张曝光合成为 16-bit HDR 图像,把中高丰度与低丰度条带同时拉进线性范围,实测可将检测范围从约 2.5 个数量级扩展到约 3 个数量级,更利于 WB 定量与复现。 

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(图1:检测范围从2.5数量级扩展至3个数量级) 

这些特性针对 WB 化学发光成像的痛点而生,让“看得清、量得准”成为常态。 

 

省时高效:直观交互与“机械级”对齐 

 

12.1 英寸电容触控屏配合一致的工作流,降低学习成本;自动变焦与自动对焦会根据样品大小自动放大至合适视野(22.5×18.0 cm 视野,最高 8×),CL1500/FL1500 采用机械变焦以提升灵敏度。 

 

更关键的是,CL1500/FL1500 支持 ±10° 机械式自动旋转:与“数字旋转”不同,机械旋转不会引入像素锯齿,条带边缘更平滑,数据完整性更好。 

 

多重荧光:一次上膜,回答更多生物学问题 

 

iBright FL1500 提供 5 组激发/发射通道,一次实验可进行最多四色荧光多重;官方列举了 AKT/GSK-3 通路等多靶标检测实例,适合通路研究与近红外(NIR)应用。滤光片范围与兼容染料在手册中给出,便于方法学设计与复现实验条件。荧光通道的曝光由 Smart Exposure 分别优化,降低多重妥协的代价。 

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(图2:大视野(22.5 x 18.0 cm)最多可采集 4 块小型印迹膜或凝胶。) 

图像拍摄即分析:从仪器到软件的一体化体验 

 

iBright Analysis Software 提供桌面版(Windows/macOS)、云端版(Thermo Fisher Connect)与 Secure 安全版;支持图库管理、自动识别泳道/条带、分子量估算、密度学与归一化,批量导出 PDF 报告与 Excel 原始数据。对 4 张 mini 膜/胶可一次自动分析,减少重复劳动与主观差异。 

 

合规支持 

 

赛默飞提供 SAE(Security, Auditing, E-signature) 方案以支持 21 CFR Part 11:账户与权限、密码策略、审计日志与电子签名均可在 SAE 管理控制台中集中配置;配合 iBright Analysis Software—Secure 与仪器固件的 SAE 模式,形成流程级合规支持(提示:合规既含技术也含流程,仍需实验室 SOP 配合)。 

 

蛋白归一化工作流程 

 

为了消除不均一的蛋白样品浓度、不一致的凝胶上样量以及从凝胶到膜的不均匀转印所带来的样品变异,通常会通过比较目标蛋白与 GAPDH、β-tubulin、β-actin 等内部管家蛋白对照,进行一个归一化步骤。尽管管家蛋白过去一直是归一化的首选,但比较目标蛋白与总泳道蛋白的策略可成为更准确的归一化方法。 

 iBright   成像系统和  iBright 分析软件提供多种定量和归一化选项,补偿实验或样品的变异,从而让您找到最适合的实验方法。 

 

安全与可持续:用绿色 LED 替代 UV 

 

iBright 成像系统采用绿色 LED 透射光源,可有效激发溴化乙锭和 SYBR Green 染料等常用 DNA 染料,同时具有更多优点。 

· 不使用有害的紫外线:尽管紫外光可有效激发许多荧光染料和染色剂,但紫外线会危害健康。此外,长时间暴露于紫外光可能会损伤 DNA 样本,并影响用于下游应用(如亚克隆)的样品完整性。 

· 无汞废物: 紫外透射灯可能含有有害物质汞,因此在处理和处置时需要特别小心。 

· 更长的使用寿命: LED 灯珠的实际使用寿命比紫外灯管长更长,因此,在仪器的使用寿命内可以节省大量成本。 

服务与支持 

 

全系附带 SmartStart 培训(CL1500/FL1500 现场培训,CL750 提供数字培训),并提供 质保与延保服务、AB Assurance Plan、IQ/OQ 等,帮助维持高开机率与合规文档完备。手册末页给出了型号对比与订购信息,便于按需选型与后续扩展。 

 

与常见替代方案的差异 

 

· 自动化与线性范围:Smart Exposure + Smart Range HDR 让 WB 化学发光的线性范围更宽;一些入门方案更依赖人工试错,重复性不易保障。 

 

· 数据完整性:机械旋转避免数字旋转的像素锯齿,条带更平滑;市面上多数仅提供数字旋转或需手工重放样品。 

 

· 多重荧光能力:FL1500 提供 5 通道、4色多重;解决了部分WB成像平台通道数少、更换滤片或近红外支持受限,方法学迁移成本更高。 

 

· 合规方案:原生的 21 CFR Part 11 支持(账户/审计/电子签名)减少外接或自建系统的不确定性。 

 

· 安全环保:绿色 LED 替代 UV,降低对人员与样品的潜在伤害与环保负担。 

以上差异点用于说明 iBright 的优势取向,具体对比仍需以各厂商公开规格与实验室既有流程为准。 

结论:功能强大易操作的 WB 与凝胶成像 

 

如果你的目标是:化学发光 Western blot 的高动态范围与定量可靠性、荧光多重的一致复现、从数据到合规的一体化、以及更安全可持续的日常操作,那么 iBright 成像系统提供的硬件、算法、软件与服务组合,能在科研真实场景中落到实处。这也是为什么越来越多团队把 iBright 作为从凝胶成像系统到多功能成像系统的升级之选,并把它用作日常的 WB 化学发光成像仪。 

如果您对产品感兴趣,希望咨询或试用,请访问赛默飞官网或联系客服400-820-5117。 

 




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