逐典全能核酸酶-纯化细胞治疗产品、抗体药物及疫苗的利器

一，核酸酶介绍

核酸酶是在核酸分解的第一步中，作用于水解核苷酸之间的磷酸二酯键的一种蛋白质。在高等动植物中都有作用于磷酸二酯键的。 不同来源的核酸酶，其专一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA，称为核糖核酸酶（RNase），有些核酸酶只能作用于DNA，称为脱氧核糖核酸酶（DNase），有些核酸酶专一性较低，既能作用于RNA也能作用于DNA，因此统称为核酸酶（nuclease）。根据核酸酶作用的位置不同，又可将核酸酶分为核酸外切酶（exonuclease）和核酸内切酶（endonuclease）。

二，核酸酶历史

20世纪70年代，在细菌中陆续发现了一类核酸内切酶，能专一性地识别并水解双链DNA上的特异核苷酸顺序，称为限制性核酸内切酶（restrictionendonuclease，简称限制酶）。当外源DNA侵入细菌后，限制性内切酶可将其水解切成片段，从而限制了外源DNA在细菌细胞内的表达，而细菌本身的DNA由于在该特异核苷酸顺序处被甲基化酶修饰，不被水解，从而得到保护。

三，核酸酶分类介绍

核酸外切酶

有些核酸酶能从DNA或RNA链的一端逐个水解下单核苷酸，所以称为核酸外切酶。只作用于DNA的核酸外切酶称为脱氧核糖核酸外切酶，只作用于RNA的核酸外切酶称为核糖核酸外切酶；也有一些核酸外切酶可以作用于DNA或RNA。核酸外切酶从3′端开始逐个水解核苷酸，称为3′→5′外切酶，例如，蛇毒磷酸二酯酶即是一种3′→5′外切酶，水解产物为5′核苷酸；核酸外切酶从5′端开始逐个水解核苷酸，称为5′→3′外切酶，例如：牛脾磷酸二酯酶即是一种5′→3′外切酶，水解产物为3′核苷酸。核酸内切酶

核酸内切酶催化水解多核苷酸内部的磷酸二酯键。有些核酸内切酶仅水解5′磷酸二酯键，把磷酸基团留在3′位置上，称为5′-内切酶；而有些仅水解3′-磷酸二酯键，把磷酸基团留在5′位置上，称为3′-内切酶。还有一些核酸内切酶对磷酸酯键一侧的碱基有专一要求，例如胰脏核糖核酸酶（RNaseA）即是一种高度专一性核酸内切酶，它作用于由嘧啶核苷酸C‘3处的羟基与下一个核苷酸C5’处的磷酸形成的3‘，5’-磷酸二脂键，产物为以3′嘧啶核苷酸结尾的低聚核苷酸和以5’核苷酸开头的低聚核苷酸。非特异性核酸酶

20世纪五六十年代，金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等分泌的胞外核酸酶也被陆续分离出来。底物测试发现这些酶对DNA和RNA表现出非专一性，因此被新归类为非特异性核酸酶。

四，全能核酸酶的商品化

全能核核酸酶是一种来源于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens，也称灵杆菌)的非特异性核酸内切酶，也称全能核酸酶或广谱核酸酶。该核酸酶可在非常宽泛的条件下降解单链、双链、线状、环状、天然或变性等各种形式的DNA或RNA，产生长度为3至5个碱基的5'-单磷酸寡核苷酸。全能核酸酶用途广泛，可用于在重组蛋白、病毒疫苗、抗体药物等生物制品生产过程中去除核酸，或用于降低细胞、组织、微生物等蛋白裂解液样品的粘度等（可以用于化学破菌而省去超声仪或高压均质机，或者结合化学破菌大幅度减少超声仪或高压均质机的工作负荷）。

五，逐典Pannarase全能核酸酶优势：

1.无动物源性、无氨苄青霉素

2.杰出单位比酶活、更高效的核酸降解能力

3.先进的生产工艺，非传统His标签纯化、排除引入金属离子风险

4.严格的质控标准，内毒水平低，确保单位酶活的准确性以及批次间稳定性

六，全能核酸酶应用条件：

全能核酸酶的酶活会受到多种因素的影响（例如温度、pH、离子强度等），故用量范围也会从0.1 U/mL-250 U/mL不等。因此，不同的操作环境下酶的最佳浓度不同，需要通过实验设置梯度进行最佳条件的摸索。

七，应用实例：

1.样品：狂犬病毒浓缩液

处理条件:核酸酶浓度50~90U/ml ,

37 ℃处理 2 h,转入18 ~ 26 ℃处理 6h

2.样品：狂犬病病毒浓缩液

处理条件：25、50和100 U/ml，37℃

3.样品：流感病毒浓缩液

处理条件：10 U/mL，37℃