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徕卡课堂丨中药取材好帮手—徕卡显微切割技术


激光显微切割技术是在显微镜下从样本中高度选择性地分离、纯化单一类型细胞群或单个细胞的新技术,它可以根据显微形态直观选择提取目标区域或结构。激光显微切割技术在植物学、病理学、肿瘤研究、神经学、细胞生物学及法医取证等方面都有着广泛的应用。本篇文章主要列举了激光显微切割技术在中药学方面的应用。

 中药研究

中药(TCM- Traditional Chinese Medicine 即“传统中医”或“传统中医药”)起源于中国。中药是指以中医药理论为指导,有着独特的理论体系和应用形式,用于预防和治疗疾病并具有康复与保健作用的天然药物及其加工代用品,主要包括植物药、动物药、矿物药。中药在我国的药品中具有非常重要的地位。中药之所以具有药用价值,主要是依靠其中所含有的生物碱或生物活性物质。虽然中药的发展在我国有上千年的历史,但是由于我们对于各种中药中活性成分的种类以及不同结构部位的含量、单分子的鉴定还不是很明确,所以限制了我国中药的深入发展。

近年来对于中药的研究越来越火热,尤其是对于不同结构中生物碱的成分、含量、单体的鉴定越来越多。以前由于取材手段的限制,研究者们不能很精确的分离中药材的特定部位,所以给后来的鉴定带来了困扰。现在激光显微切割技术,作为一种能够在细胞水平上,分离特定组织结构的手段,解决了很多研究者的困难。激光显微切割技术是在显微镜下,依靠形态学或是荧光标记区分不同的细胞形态和结构,依靠高能的激光束分离、切割样品,获得高度单一纯化样品的技术。激光显微切割技术在中药的研究中越来越广泛得到应用。

应用案例

大麻毛状体研究:众所周知,香毛簇是大麻属植物产生大麻素的主要部位,也是大麻素含量最高的部位。本应用主要是利用激光显微切割技术获得8周时各种类型香毛簇并且结合液质联用分别鉴定成分的种类和含量的高低。

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徕卡激光显微切割独家的实时切割功能,灵活自如,成为了这种在实体药材上直接切割香毛簇的最佳方式。

大黄的研究:激光显微切割与液质联用分析大黄的次级代谢产物。

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徕卡LMD6与LMD7

徕卡作为显微镜生产和研发的世家及领导者,为广大用户提供优质的产品。徕卡推出了两款型号的激光显微切割系统:LMD6和LMD7。两款型号的区别在于所配备的激光器不同。LMD6配备固定频率的高能激光器,主要适合常规病理切片和一些相对较薄的植物或其它组织的切片。LMD7配备了一款功率更高、频率可调的高能固体激光器,它可以通过调节频率来改变激光的脉冲能量来适合不同样品。LMD7对样品的兼容性非常好,适合各种类型的样品包括组织切片、植物切片、涂片、活细胞等样品。

   

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                    LMD6                                      LMD7

徕卡激光显微切割的最大特点是采用独家专利的激光扫描式切割,重力一步法收集。扫描式切割是在切割过程中,高能激光束快速、精准的切割样品,区别于物台移动方式切割。重力一步法收集是最温和和最高效的收集方式,完成切割即完成收集,提高实验速度。LMD7拥有目前最大功率的激光器,非常适合切割例如中药等植物切片。

大家还可以登录徕卡的Science Lab网站,上面有各种产品的最新相关应用。

http://www.leica-microsystems.com/science-lab/topics/

参考文献:

1、Analysis of cannabinoids in laser-microdissected trichomes of medicinal Cannabis sativa using LCMS and cryogenic NMR .  N. Happyana et al. / Phytochemistry 87 (2013) 51–59

2、Profiling of secondar y metabolites in tiss uesfrom Rheum palmatum L. using laser microdissectionand liquid chromatography mass spectrometry.   Z. Liang et al Anal Bioanal Chem (2013) 405:4199-4212

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