从机载测绘到天文成像再到制造检测,多光谱成像(MSI)长期以来一直是提取关键细节的首选工具,它通常来自远景。如今,MSI正在生物医学应用领域取得巨大进展,其无创、经济高效的成像能力可实时提供可定制的信息。
“有可能你在医生的办公室或医院都没有使用过光谱传感,但光谱传感非常普遍。”佛罗里达州海洋光学光谱专家、医学营销经理Heather Lovelady说。血氧计,也就是测量血液中氧含量的手指般大小的夹子,是光谱传感器。从最简单的脉冲OX到复杂的PCR(聚合酶链式反应)诊断,光谱传感已成为医学中不可或缺的一部分。
顾名思义,MSI涉及相对有限数量的光谱带(通常在3到10之间),将光谱信息与空间信息相结合以提供空间数据。凭借由此产生的可管理数据量,MSI在处理活组织时具有至关重要的优势:实时成像。
人扁桃体用dapi(4',6-二氨基-2-苯基吲哚)和5种不同的量子点标记的一级抗体对ki67(伪色蓝色)、cd3(黄色)、cd20(红色)、igd阳性(绿色)和cd68(青色)(a)进行染色。用微差多光谱照相机对染色标本进行成像,并用优化的光谱末端成员(b)对单个通道进行非混合。皮层和地幔区(左上角,b)分别由黄色和绿色细胞显示。样品由Stefania Pittaluga博士/国家癌症研究所提供。光谱分析由Richard Levenson博士/UC Davis Health提供。
“因为我们有处理空间视觉数据的连线,因此这就成为了一种非常直观的信息传递方式,”Lovelady说。从用户的角度来看,在采用方面的障碍很少。大多数挑战在于开发适合特定应用的正确产品。”
烧伤的智能成像
据Lovelady所说,“当在手术过程中成像ICG(吲哚青绿)荧光(一种常用的染料,旨在提供额外的信息)时,你可以用近红外摄像机看到它,但是你会失去视觉范围的彩色图像。MSI可以同时用一台相机进行成像,“通过精确的分析消除猜测不仅可以减少疤痕,还可以加快恢复速度,为患者提供更好的整体治疗体验。“即使在手术室之外,”她说,“传感和成像也是医疗器械清洁度验证、制药过程控制和无创检测的热门话题。”
新生儿无疼痛血液分析。光谱学是检测新生儿胆红素浓度的一种快速、简便的方法。由海洋光学公司提供。
对速度的需求 增强荧光成像
MSI是荧光成像中使用的默认方法之一,通常与光栅共聚焦显微镜和光谱解析的雪崩光电二极管一起使用。该技术涉及用荧光团标记感兴趣的细胞,该荧光团可以在不同的光谱带中激发和/或发射。由于荧光显微镜在几个波长区域中获得相同的图像,光栅化会在空间(和时间)上显示细胞的亚细胞细节。Sonder强调了多光谱成像的关键优势之一,即在细胞内相互作用研究中同时分离不同荧光团的能力。“通常情况下,在任何给定时间照射下,制备的样品可能会发出两到四种不同的光谱,”他说。“今天,[低成本]显微镜中的滤光片立方体用于通过滤光片切换将这些光谱分开。”虽然领先的显微镜公司提供同时光谱采集的高端系统,但高价格往往令人望而却步,并限制个别研究人员或中型公司维护自己的系统。他说:“这限制了快速访问评估,使实验设计变得复杂。”然而,研究人员将这种技术(光栅、多光谱共焦显微镜)视为“黄金标准”,任何新技术都需要根据这一标准进行自我测量。”
描述TME的特征
可视图像-5个DAPI丛成像的演示
IF(以及相关的显色技术、免疫组织化学或IHC)涉及对细胞和组织中的某些蛋白质进行染色以识别特定抗原。通过标记反欧元纸币图像,用具有三种不同输出(颜色、单色和近红外)的多光谱照相机拍摄。光源为白色LED(彩色和单色)和850 nm LED(近红外)。钞票上的建筑窗口图像有一半是用红外安全墨水打印的,肉眼看不见(以彩色和单色图像显示)。在850纳米的光源下,近红外通道揭示了不可见的特征。由Teledyne Dalsa提供。
体内有荧光标记物或酶,抗原/抗体的相互作用可以通过荧光或比色检测来观察。这项技术目前受限于使用必须具有明显的区别荧光团。然而,通过应用MSI成像和软件后染色,光谱重叠荧光团可以有效地“不混合”。要为每个应用程序定制要测量的多光谱波段确实需要一些前期工作。但是Levenson已经表明,一旦生成了合适的光谱库,就可以完成线性非混合。这种强大的技术已经大大提高了中频污点的图像分析量化能力。
由美国生命科学和诊断巨头Perkinelemer公司开发的Vectra Polaris利用了这一方法。该方法与公司的信息软件配合使用,可以将七种颜色和九种颜色进行混合。最终,科学家可以在多个尺度上探索生物组织,从细胞到细胞的相互作用到宏观组织结构。不幸的是,在病理学实践中临床应用和采用新技术存在许多障碍,Borowsky得出结论,剩下的障碍包括将MSI纳入培训、明确应用以推动采用和技术投资,以及协同进化和采用MSI进行常规日常诊断。但是海洋光学的Lovelady指出,随着世界逐渐从一刀切的药物转向个性化和可访问性,对分析结果的新技术的需求将继续发展。
多光谱成像和传感肯定会对生物医学诊断,治疗和治疗至关重要,并且随着成本的降低和潜在的益处得到认可,预计它将成为未来几年越来越多应用的支持技术。