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利用基于诱导多能干细胞的神经突生长 测定法进行神经毒性和神经元发育的评估
| 领域： | 细胞生物学,生理生态,分子生物学,蛋白/抗体/蛋白质组,基因/基因组/测序,神经科学/脑科学 | ||
| 项目： | 利用基于诱导多能干细胞的神经突生长 测定法进行神经毒性和神经元发育的评估 | 参考： | Radio, N.M., Breier, J.M., Reif, D.M., Judson, R.S., |
| 方案文件名 | 下载 |
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利用基于诱导多能干细胞的神经突生长 测定法进行神经毒性和神经元发育的评估 |
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介绍
对环境中未经检验的化学品日益普遍的关注 已经产生了开发可靠和有效的筛选工具以识 别可能影响人类健康的1，特别是神经系统 发育的化学物质的迫切需求。
我们评估了一种神经突向外生长的测定方 法，通过筛选和表征所选化合物的活性，评 估其是否可能对发育中的神经系统产生不利 影响。选择该测定法是因为其在神经系统发 育关键过程的模型具有一定相关性，特别是 神经元会通过延伸其神经突以形成完整的神 经网络2。破坏这一过程可能会对人类和啮 齿动物产生不利影响，因此研究表明，未成 熟、发育中和成熟的神经突是化学毒性的靶标3。
虽然神经突向外生长测定主要用于评估发育 神经毒性，但也可用于评估通过检测神经突 收缩的神经变性。此外，该测定还有可能与 评估成年神经元中的神经可塑性相关4。对 于筛选测定，总神经突向外生长通常是指标 报告中最常见的度量标准1,5。利用自动成像 还能够对其他特征进行多参数评估，例如总 分支数和总过程数，以评估化合物可抑制神 经突向外生长的不同方式6,7。
材料
• ImageXpress Nano 自动成像系统，配备 CellReporterXpress 自动图像采集和 分析软件 (Molecular Devices)
• iCell® 神经元 (Cellular Dynamics International)
• Poly-d-赖氨酸预包被 384 孔板 (Corning Life Sciences)
• 层粘连蛋白 (Sigma- Aldrich)
• 多聚甲醛 (Sigma-Aldrich)
• 胎牛血清 (Sigma-Aldrich)
• β-微管蛋白 III APPLICATION NOTE (TUJ-1) (BD Biosciences)
• Hoescht (ThermoFisher Scientific)
• 抗 β-微管蛋白抗体 (BD Biosciences)
• Calcein AM (ThermoFisher Scientifiic)
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