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【应用文章下载】如何在 SpectraMax iD3 和 iD5 微孔读板机上优化 Transcreener FI 检测 |
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Transcreener® HTS 是一种通用的,高通量的生化测定平台,该测定法是基于二磷酸 核 苷 酸 (ADP/GDP) 的 检 测,二磷 酸 核苷酸可由数千种激酶催化而形成,其中很多激酶的催化共价调节反应对细胞的信号传导至关重要,并作为靶标在药物发现中具有重要价值。
Transcreener®FI 测定法是一步竞争性免疫测定法,直接检测带有红色荧光 (FI) 的核苷酸的荧光强度。该测定体系中使用的是与高特异性单克隆抗体 - 淬灭剂偶联物结合的红色示踪剂。目标酶产生的二磷酸核苷酸置换了抗体 - 淬灭剂偶联物中的示踪剂,导致荧光强 度增加 ( 图 1 )。 使 用红色 示 踪 剂可最 大程 度 地 减 少荧 光化合物 和 光 散 射 的 干 扰,Transcreener FI 测定法是专为 HTS 设计的,采用一步添加,混合和读取的测定模式。